環(huán)孢素A聯(lián)合沙利度胺治療低危骨髓增生異常綜合征外周血MDSC、T細(xì)胞亞群、細(xì)胞因子的表達(dá)變化及相關(guān)性研究.pdf

1、目的：通過研究低危（IPSS評分低危、中危-1）骨髓增生異常綜合征（Myelodysplastic Syndromes，MDS）患者經(jīng)環(huán)孢素聯(lián)合沙利度胺治療前后外周血中髓源性抑制細(xì)胞（Myeloid-derived suppressor cells，MDSC）、T淋巴細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)特征以及相關(guān)性分析，觀察低危MDS患者的免疫狀態(tài)，并進一步探討MDSC細(xì)胞在MDS免疫發(fā)病機制中的作用。
　　方法：收集2015年1月~201

2、6年12月在蘭州大學(xué)第二醫(yī)院血液科住院部確診的初治、原發(fā)性低危骨髓增生異常綜合征（IPSS評分低危、中危-1）患者17例，健康對照組9例，患者均應(yīng)用環(huán)孢素聯(lián)合沙利度胺治療。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分別檢測MDS患者治療前后和健康對照組外周血中MDSC細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、Th1細(xì)胞、Th2細(xì)胞、Th17細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cells，Treg）及CD3+CD8—IL-10+細(xì)胞比例；應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(e

3、nzyme linked immunosorbent assay，ELISA)分別檢測MDS患者治療前后和健康對照組外周血干擾素-γ（interferon-gama，IFN-γ）、白介素-4（interleukin-4，IL-4）、白介素-17（interleukin-17，IL-17）、白介素-10（interleukin-10，IL-10）和腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）細(xì)胞因

4、子的水平變化；使用SPSS19.0軟件分析治療前后、健康對照組之間各細(xì)胞及因子的表達(dá)差異，并對MDSC細(xì)胞與臨床指標(biāo)、不同T淋巴細(xì)胞亞型及細(xì)胞因子進行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：1.與健康對照組相比，患者治療前外周血中的MDSC細(xì)胞比例更高（2.35±1.76％vs0.87±0.19%，P＜0.01）；與治療前相比，患者治療后外周血中MDSC細(xì)胞比例有所降低（1.46±0.77%vs2.35±1.76%，P＜0.05），差異均有統(tǒng)計學(xué)

5、意義；2與健康對照組相比，患者治療前外周血中的CD4+T細(xì)胞比例更低（35.26±3.87%vs48.72±1.82%，P＜0.01），CD8+T細(xì)胞比例更高（28.40±5.29%vs21.53±3.91%，P＜0.05），CD4+T/CD8+T比值更低（1.28±0.28vs2.33±0.43，P＜0.01）；與治療前相比，患者治療后外周血中CD4+T細(xì)胞比例有所升高（39.80±2.94%vs35.26±3.87%，P＜0.01）

6、，CD8+T細(xì)胞比例有所降低（24.18±2.63%vs28.40±5.29%，P＜0.05），CD4+T/CD8+T比值升高（1.66±0.18vs2.33±0.43，P＜0.01），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義；3.與健康對照組相比，患者治療前外周血中Th1細(xì)胞比例更高（13.95±1.42%vs10.43±0.59%，P＜0.01），Th2細(xì)胞比例更低（0.78±0.11%vs0.90±0.05%，P＜0.01），Th1/Th2比值更高（1

7、8.29±3.39vs11.59±1.04%，P＜0.01），Th17細(xì)胞比例更高（1.89±0.48%vs0.96±0.18%，P＜0.01），Treg細(xì)胞比例更高（6.80±0.93%vs5.80±0.99%，P＜0.01）；與治療前相比，患者治療后外周血中Th1細(xì)胞比例有所下降（11.4±1.27%vs13.95±1.42%，P＜0.01），Th2細(xì)胞比例有所升高（0.88±0.11%vs0.78±0.11%，P＜0.01），Th

8、1/Th2比值降低（13.16±1.80vs18.29±3.39，P＜0.01），Th17細(xì)胞比例下降（1.41±0.33%vs1.89±0.48%，P＜0.01），Treg細(xì)胞比例下降（5.35±0.68%vs6.80±0.93%，P＜0.01），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義；4.與健康對照組相比，患者治療前外周血中CD3+CD8—IL-10+細(xì)胞比例更高（5.72±1.30%vs3.39±0.79%，P＜0.01），與治療前相比，患者治療后C

9、D3+CD8—IL-10+細(xì)胞比例降低（4.72±0.89%vs5.72±1.30%，P＜0.01），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義；5.與健康對照組相比，患者治療前血清中IFN-γ水平更高（11.16±1.20%vs6.19±0.97%，P＜0.01），IL-4水平更低（19.39±2.64%vs22.63±2.59%，P＜0.05），IL-17水平更高（27.05±1.46%vs18.89±1.01%，P＜0.01），IL-10水平更高（43.

10、33±4.67%vs4.21±1.30%，P＜0.01），TNF-α水平更高（29.03±8.75%vs6.02±1.01%，P＜0.01）；與治療前相比，患者治療后血清中IFN-γ水平降低（8.10±1.06%vs11.16±1.20%，P＜0.01），IL-4水平升高（21.12±2.17%vs19.39±2.64%，P＜0.05），IL-17水平降低（21.67±1.52%vs27.05±1.46%，P＜0.01），IL-10水平

11、降低（14.51±2.47%vs43.33±4.67%，P＜0.01），TNF-α水平下降（18.45±1.76%vs29.03±8.75%，P＜0.01），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義；6.對MDS患者治療前外周血中的MDSC細(xì)胞比例進行相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)其與患者血紅蛋白（Hb）水平呈負(fù)相關(guān)（r＝－0.497，P＜0.05），與CD4+T細(xì)胞比例呈負(fù)相關(guān)，（r＝－0.827，P＜0.01），與Th17細(xì)胞比例呈正相關(guān)（r＝0.595，P＜0.05

12、），與Treg細(xì)胞比例呈高度正相關(guān)（r＝0.724，P＜0.01），與CD3+CD8—IL-10+細(xì)胞比例呈正相關(guān)（r＝0.588，P＜0.05），與血清中IL-17細(xì)胞因子水平也呈正相關(guān)（r＝0.498，P＜0.05），與血清中IL-10細(xì)胞因子水平也呈正相關(guān)（r＝0.686，P＜0.05），與血清中TNF-α水平呈正相關(guān)（r＝0.581，P＜0.05），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：1.低危MDS患者外周血MDSC細(xì)胞比例較

13、健康人群明顯升高，且與患者外周血Hb水平呈負(fù)相關(guān)；2.低危MDS患者外周血T淋巴細(xì)胞免疫異常，CD4+T及CD8+T細(xì)胞免疫失衡，CD4+T細(xì)胞亞群中Th1、Th17及Treg細(xì)胞均較健康人群升高，Th1細(xì)胞/Th2細(xì)胞平衡紊亂，相關(guān)細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17、IL-10和TNF-α水平異常，環(huán)孢素A聯(lián)合沙利度胺可在一定程度上改善免疫紊亂；3.低危MDS患者外周血MDSC細(xì)胞比例與CD4+T細(xì)胞比例呈負(fù)相關(guān)，與Th17及T