2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、中山大學博士學位論文凋亡抑制蛋白hIAP-2和Survivin的基因功能及其siRNA的抑癌機制研究姓名:李莉萍申請學位級別:博士專業(yè):生物化學與分子生物學指導教師:羅超權20041018凋亡抑制蛋白h l A P - 2 和s u r v w i n 的基因功能及其蝴N A 的抑癌胡制研究 中文l 要二、I W r T 法測定細胞增殖,m U 6 /s u r v i v i n 質粒與m U 6 /h I A P .2 質粒均能夠顯

2、著地抑制癌細胞增殖,而對正常細胞L - 0 2 和N I H 3 T 3 沒有明顯的抑制作用,顯示其良好的腫瘤特異性。三、流式細胞儀檢測細胞周期和細胞凋亡,結果顯示m U 6 /s u r v i v i n 質粒與m U 6 ,I l I A P .2 質粒均阻滯M C F .7 細胞周期在G 1 期,細胞凋亡不明顯。四、熒光顯微鏡觀察H o e c h s t 染色細胞形態(tài)學變化,m U 6 /s u r v i v i n 質?;?/p>

3、m U 6 /h l A P .2 質粒作用后,均使M C F 一7 細胞產(chǎn)生大量的多核、核腫脹細胞,提示細胞裂亡可能是其造成細胞增殖抑制的主要原因。五、W e s t e r n b l o t 檢測細胞總蛋白中c a s p a s e .3 、C y t C 、p 2 1 w m 、N F - 《..B 和1 w B , x等多種相關基因的蛋白質水平變化,用c a s p a s e .3 底物A C - D E V D .p N

4、 A 檢測c a s p a s e .3 活性o m U 6 /s u r v i v i n 質粒與m U 6 /h l A P 一2 質粒均使c a s p a s e .3 活化,p 2 1 w m和I K .B , a - 蛋白表達水平上調。m U 6 /s u r v i v i n 質粒使C y t C 蛋白表達上調,N F - r .B 蛋白表達未見明顯變化,推測其作用機制與線粒體凋亡路徑有關,而m U 6 /h I A

5、 P .2質粒使N F 甜j 蛋白表達下調,C y tC 蛋白表達未見明顯變化,推測其作用機制與N F - r .B 路徑有關。六、m U 6 /s u r v i v i n 質粒與m U 6 /h l A P 一2 質粒協(xié)同抑制M C F .7 細胞增殖,促進D N A 的裂解,H o e c h s t 染色除看到大量的多核、巨核細胞外,還可看到散在分布的凋亡細胞。W e s t e r n b l o t 結果顯示,C y tC

6、 、c a s p a s e 一3 原、p 2 1 w “n 和b ^ B 口蛋白表達水平上調,N F 柏蛋白表達下調,c a s p a s e - 3 活性升高。七、m U 6 /s u r v i v i n 質粒、m u 6 /h I A P 一2 質粒分別與多種常用腫瘤化療藥物合用,結果顯示它們均能顯著地增強D N A 功能抑制劑順鉑和環(huán)磷酰胺的抑癌作用,但對順鉑誘導的細胞凋亡沒有促進作用;m U 6 /s u r v i

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