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文檔簡介
1、目的:合成凋亡抑制蛋白(hIAP-2)的siRNA,觀察其對SMMC-7721細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響。
方法:化學(xué)合成三條hIAP-2-siRNA干擾片段并用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染SMMC-7721細(xì)胞,同時設(shè)陰性體對照。實(shí)時熒光定量PCR和westernblotting檢測hIAP-2-siRNA作用后SMMC-7721細(xì)胞中hIAP-2 mRNA和蛋白的表達(dá),MTT檢測SMMC-7721細(xì)胞增殖能力變化,AV-PI流式細(xì)胞術(shù)檢測各
2、組SMMC-7721細(xì)胞轉(zhuǎn)染48h后的凋亡率變化,Transwell檢測細(xì)胞侵襲能力的變化。
結(jié)果:Q-PCR及Western blotting檢測顯示3條siRNA均能有效抑制hIAP-2 mRNA及蛋白表達(dá)(P<0.05),以siRNA1作用效果最顯著(P<0.05)。MTT檢測顯示hIAP-2-siRNA轉(zhuǎn)染24、48和72h后的SMMC-7721細(xì)胞的增殖受到顯著抑制(P<0.05);流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示hIAP-2
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