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文檔簡介
1、 本研究為了分離具有自主產(chǎn)權(quán)的葉片特異啟動子，采用接頭PCR的方法克隆了長度為1415bp的PNZIP啟動子并將其與GUS基因融合，然后對PNZIP啟動子進行了組織表達分析、5’端缺失分析、3’端缺失分析，同時利用酵母單雜交的技術(shù)分離了一個可以和該啟動子結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子，并對該轉(zhuǎn)錄因子進行了表達分析以及體內(nèi)、體外功能分析，研究發(fā)現(xiàn)： PNZIP啟動子是一個光合組織特異表達啟動子，它主要驅(qū)動GUS基因在葉肉的柵欄組織和海綿組織中表達，而
2、在根、花、萼片和子房中不表達；在PNZIP啟動子中G-box和GATACT元件單獨并不能賦予啟動子葉片特異表達的特性，只有兩者相互作用才能決定啟動子的特異表達，而PNZIP啟動子中的Box-Ⅱ和類AT-1元件作為正調(diào)控元件可以增強報告基因的表達活性；電泳遷移變動分析實驗證明GAAATA元件可以和煙草核蛋白抽提物特異的結(jié)合，Northern雜交表達分析表明NtbZIP基因在煙草的根、莖、葉中均有表達，為進一步的研究NtbZIP基因功能奠定
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