抵抗素樣分子β在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性中的作用.pdf

1、目的：目前研究顯示，急性心血管事件的主要病因是動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊的形成及其繼發(fā)病變。易損斑塊亦稱不穩(wěn)定斑塊，主要的病理學(xué)特點(diǎn)包括大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、較薄的纖維帽和較大的脂質(zhì)核心。其中炎癥機(jī)制貫穿于動(dòng)脈粥樣硬化病變的發(fā)生、發(fā)展及惡化的整個(gè)過程，在易損斑塊的形成與進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。斑塊內(nèi)大量炎癥細(xì)胞聚集，多種細(xì)胞因子和酶激活，加速斑塊不穩(wěn)定性的進(jìn)展，最終破裂。抵抗素樣分子β（Resistin-like moleculeβ，RELMβ）是一

2、種抵抗素相關(guān)蛋白，既往認(rèn)為局限表達(dá)于胃腸道細(xì)胞。近年研究發(fā)現(xiàn)，其在心、肺及腎等多種器官的巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞(smooth musclecell，SMC)中有表達(dá)，能夠促進(jìn)局部炎癥反應(yīng)。但目前RELMβ在動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊中是否發(fā)揮確切作用尚不十分明確。本實(shí)驗(yàn)旨在抵抗素樣分子β(RELMβ)在動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊模型中的作用。
　　方法：
　　采用常用的ApoE-/-小鼠，制作頸動(dòng)脈斑塊模型。雄性ApoE-/-小鼠

3、先行普通飲食喂養(yǎng)2周。后給予高脂飲食（飼料主成分0.25％膽固醇+15％脂肪）喂養(yǎng)2周。隨后小鼠戊巴比妥充分麻醉，消毒，作頸部正中切口，充分暴露右側(cè)頸總動(dòng)脈。用長(zhǎng)3mm、內(nèi)徑0.3mm硅膠套管套置于頸總動(dòng)脈外周，固定套管，縫合切口。繼續(xù)高脂飲食喂養(yǎng)8周后，行頸總動(dòng)脈局部慢病毒轉(zhuǎn)染。根據(jù)轉(zhuǎn)染慢病毒的不同，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、si-NC組和si-RELMβ組，每組20只。RELMβ干擾序列:5'-GGAGAGTGAATCTGCTCTTAG-

4、3'。繼續(xù)高脂喂養(yǎng)。4周后，小鼠腹腔注射麻醉劑安樂死，收集血液及頸總動(dòng)脈標(biāo)本。檢測(cè)血清中血脂含量。本實(shí)驗(yàn)采用蛋白印跡(Western blot)法檢測(cè)斑塊內(nèi)RELMβ蛋白表達(dá)含量。采用天狼猩紅染色檢測(cè)斑塊內(nèi)膠原含量，油紅O染色檢測(cè)脂質(zhì)含量。采用免疫組化染色法檢測(cè)斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、白介素-1β（IL-1β）和白介素-6(IL-6)的含量。
　　結(jié)果：
　　3組小鼠體質(zhì)量及血脂水平無明顯差異。si-RELMβ組RELM