白花前胡有效成分Pd-Ia對小鼠急性肺損傷的作用及機制研究.pdf

1、目的:隨著環(huán)境的不斷惡化，空氣質(zhì)量越來越差，并且已經(jīng)嚴重影響到了人們的身體健康，霧霾已經(jīng)遍布中國的眾多城市，使得呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)病率日漸升高。急性肺損傷(ALI)/呼吸窘迫綜合征（ARDS）都是比較常見的臨床呼吸系統(tǒng)疾病，ARDS對于臨床疾病來說，可謂是災難性的，屬于嚴重的呼吸衰竭，目前無有效的藥物治療措施。ALI是ARDS的早期階段，其特點是彌漫性的炎癥損傷，目前研究發(fā)現(xiàn)中藥白花前胡根中提取出的活性成分白花前胡甲素(Pd-Ia)在LP

2、S誘導的內(nèi)皮細胞炎癥損傷中具有良好的抗炎效果，這給予我們一個很大的啟發(fā)，Pd-Ia在ALI中是否也會具有相同的抗炎作用，從而有效的改善肺部損傷，本課題采用LPS誘導小鼠ALI，從體內(nèi)外對于Pd-Ia在ALI中的作用以及相關機制做了初步研究。
　　方法:異氟烷深度麻醉小鼠后，用移液器吸取LPS后通過鼻腔滴注誘導ALI模型，1h后腹腔注射給予Pd-Ia治療，24h后處死小鼠，采集相關組織標本進行后續(xù)檢測。采用HE染色評判肺組織病理學改

3、變程度。通過對肺泡灌洗液(BALF)中的細胞進行分類計數(shù)判斷肺部炎性細胞浸潤情況。利用Real-timePCR、ELISA、Western blot檢測相關炎性因子的基因以及蛋白表達變化。在體外利用Real-time PCR、Western blot檢測了相關信號通路的變化，對Pd-Ia在ALI中的作用機制做初步探討。
　　結果:通過鼻腔滴注LPS，成功的誘導了小鼠ALI模型，小鼠ALI模型中肺泡間隔明顯增寬，肺部出現(xiàn)大量的炎性細

4、胞浸潤，炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6以及趨化MIP-1α、MIP-2的表達明顯增高。經(jīng)給予Pd-Ia治療后發(fā)現(xiàn)粒細胞浸潤明顯減少，肺泡間隔增寬明顯改善，并且主要炎性因子以及趨化因子的表達也明顯降低。同時發(fā)現(xiàn)在LPS誘導的小鼠ALI模型中Pd-Ia能夠抑制P38MAPK/NF-κB的活化，從而抑制炎癥的發(fā)生發(fā)展。此外我們還發(fā)現(xiàn)Pd-Ia影響了過氧化物酶體增殖物激活受體-α(PPAR-α)的表達，利用PPAR-α敲除小鼠我們進一

5、步研究發(fā)現(xiàn)，在PPAR-α敲除后，Pd-Ia對ALI無明顯的改善作用。這可能是Pd-Ia對ALI調(diào)節(jié)過程中的新靶點。在體外實驗中我們通過研究Pd-Ia對LPS誘導的巨噬細胞的炎癥反應發(fā)現(xiàn)，Pd-Ia同樣具有抗炎作用，并且發(fā)現(xiàn)能IκB-ζ可能與Pd-Ia通過PPAR-α對炎癥的調(diào)節(jié)機制有關。
　　結論: Pd-Ia對于LPS誘導的小鼠ALI具有改善作用，其機制可能與P38MAPK/NF-κB信號通路有關，PPAR-α可能是其調(diào)節(jié)機制