小鼠急性皮膚缺損創(chuàng)面GMCSF表達(dá)特點(diǎn)及其作用機(jī)制.pdf

1、目的:探討創(chuàng)面愈合過(guò)程中?！奘杉?xì)胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)的表達(dá)變化及其在創(chuàng)面愈合中的作用和機(jī)制。
　　 方法:采用小鼠全層皮膚缺損傷模型。局部麻醉后起效后在背部中線近頸側(cè)制作1.0cm×1.0cm大小全層皮膚缺損傷創(chuàng)面。50只雄性昆明小鼠隨機(jī)分為2組:對(duì)照組(25只)和GM.CSF實(shí)驗(yàn)組(25只),每組分為5個(gè)時(shí)間點(diǎn)(每個(gè)時(shí)

2、相點(diǎn)5只)。實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面用rhGM-CSF(recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor)凝膠(10μg/cm2)涂抹,對(duì)照組創(chuàng)面用凝膠基質(zhì)涂抹。于傷后第3,5,7,10和14天,觀察創(chuàng)面愈合時(shí)間;計(jì)算創(chuàng)面愈合率;切取創(chuàng)面組織,檢測(cè)病理組織學(xué)變化;通過(guò)CD31免疫組化染色結(jié)果分析,計(jì)算創(chuàng)面微血管密度;應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)創(chuàng)面GM-CSF、血小板源性生長(zhǎng)

3、因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascularendothelial growth factor,VEGF)和基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(Stromal cellderived factor-1,SDF-1)基因表達(dá)變化。
　　 結(jié)果:RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示小鼠致創(chuàng)后創(chuàng)面GM-CSF基因表達(dá)傷后3d達(dá)峰值(P＜0.01),直到傷后10d均維持較高水平(P＜0.05)

4、,傷后14d其表達(dá)顯著下調(diào)接近正常;應(yīng)用rhGM-CSF凝膠后,創(chuàng)面愈合時(shí)間較對(duì)照組平均提前(2.4±0.27)d,其創(chuàng)面愈合率于傷后7～14d顯著升高(P＜0.05);組織學(xué)顯示創(chuàng)傷早期創(chuàng)面中性粒細(xì)胞數(shù)量較少,創(chuàng)沿上皮細(xì)胞增殖數(shù)量較多,創(chuàng)面肉芽組織增生明顯,并且細(xì)胞密度大以梭形細(xì)胞和卵圓形細(xì)胞為主,新生血管數(shù)量較多;創(chuàng)面微血管密度在傷后7～14d顯著增加(P＜0.05);VEGF和SDF-1基因分別于傷后7d和10d內(nèi)表達(dá)顯著上調(diào)(P