電針加艾灸對AD模型大鼠細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子cyclinE、p21-cip的影響.pdf

1、目的:
　　 通過本實驗，觀察電針和艾灸聯(lián)合運用對阿爾茨海默病模型大鼠行為學(xué)以及海馬CA1區(qū)細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子cyclinE、p21/cip的影響，探討電針加艾灸改善AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力和影響神經(jīng)細(xì)胞凋亡的機制。以期進一步揭示中醫(yī)針灸治療AD的作用機理，并為針灸在臨床上更好地防治AD提供實驗依據(jù)。
　　 方法:
　　 將雄性wistar大鼠90只進行Y型水迷宮測試（即將反應(yīng)過于靈敏和過于遲鈍的大鼠剔除），經(jīng)篩

2、選出的標(biāo)準(zhǔn)大鼠再隨機分成4個組:正常組、假手術(shù)組、模型組、電針加艾灸組（以下簡稱治療組），每組20只。用微量注射器從雙側(cè)海馬CA1區(qū)注入Aβ1-42寡聚體制作AD大鼠模型。
　　 造模成功后，治療組先用電針刺激再用艾條溫和灸大鼠的“百會”、“腎俞”穴，治療完成后的第二天即開始進行Morris水迷宮(Morris watermaze，MWM)定位航行實驗和空間探索實驗，實驗共歷時5天，實驗結(jié)束當(dāng)天即取材，采用免疫組織化學(xué)法和免疫印

3、跡法檢測大鼠海馬區(qū)cycl inE、p21/cip含量的變化。用SPSS Statistics17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.行為學(xué)檢測結(jié)果:經(jīng)過定位航行實驗和空間探索實驗的測試，正常組與假手術(shù)組相比，大鼠的逃避潛伏期、跨越原平臺的次數(shù)和在原平臺停留的時間均無明顯差異(P＞0.05);與模型組比較，正常組、假手術(shù)組和治療組都存在顯著性差異(P＜0.05)，治療組的行為學(xué)檢測明顯優(yōu)于模型組(P＜

4、0.05);與治療組比較，正常組和假手術(shù)組有顯著差異性(P＜0.05)。
　　 2.免疫組化結(jié)果表明:正常組與假手術(shù)組相比，cyclinE和p21/cip的表達均不存在顯著差異性(P＞0.05);與模型組比較，正常組、假手術(shù)組和治療組大鼠海馬區(qū)的cyclinE和p21/cip表達量均存在顯著性差異(P＜0.05)，其中，模型組大鼠cyclinE的陽性細(xì)胞個數(shù)明顯多于其他三組。而p21/cip的陽性細(xì)胞個數(shù)明顯少于其他三組(P＜0

5、.05);與治療組比較，正常組和假手術(shù)組p21/cip的陽性細(xì)胞數(shù)有顯著差異性(P＜0.05)。
　　 3.免疫印跡結(jié)果表明:治療組大鼠海馬CA1區(qū)cyclinE表達量高于正常組和假手術(shù)組(P＜0.05)，且治療組明顯低于模型組(P＜0.05);p21/cip在模型組的表達明顯少于正常組和假手術(shù)組(P＜0.05)，而治療組明顯多于模型組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.因為AD的根本病機是腎虛髓空、神機

6、失用，故本研究選用百會和腎俞穴進行艾灸和電針刺激，可以達到益腎填髓、聰腦益智的治療目的。
　　 2.通過電針和艾灸的聯(lián)合治療能有效提高AD模型大鼠的學(xué)習(xí)和記憶功能，減輕其不斷退化的記憶和認(rèn)知功能所造成的癥狀，從而延緩衰老的進程。
　　 3.電針加艾灸能明顯降低AD模型大鼠海馬CA1區(qū)cyclinE的過度表達，增加p21/cip的表達量，從而調(diào)控細(xì)胞的分裂周期，減少神經(jīng)元的凋亡。
　　 4.針灸治療阿爾茨海默病的作