馬鈴薯Y病毒CP基因介導(dǎo)抗性與轉(zhuǎn)基因整合方式的關(guān)系及抗性傳導(dǎo).pdf

1、該研究的主要內(nèi)容包括:利用已獲得的轉(zhuǎn)非翻譯PVY CP(pPVYCPM)不同抗性的煙草,研究外源基因的整合方式與RNA介導(dǎo)病毒抗性的關(guān)系;通過(guò)不同抗性材料的嫁接試驗(yàn),對(duì)RNA介導(dǎo)抗性的傳導(dǎo)規(guī)律以及馬鈴薯Y病毒(PVY)的傳播移動(dòng)規(guī)律加以研究.具體結(jié)果如下:1.在轉(zhuǎn)pPVYCPM基因煙草Southern blot分析時(shí)發(fā)現(xiàn),同一轉(zhuǎn)基因植株的基因組DNA用不同酶切時(shí)所得到的拷貝數(shù)不同,如用HindⅢ酶切時(shí)M4-1,M74-1,M84-1,M

2、18-1的拷貝數(shù)分別為7,6,5,4;而用EcoRI酶切拷貝數(shù)分別為2,4,4,5.2.對(duì)轉(zhuǎn)pPVYCPM基因的不同抗性轉(zhuǎn)基因株系T<,1>代的研究表明,轉(zhuǎn)基因的拷貝數(shù)與植株的抗病性有一定的聯(lián)系.3.從已獲得的轉(zhuǎn)非翻譯PVY CP基因煙草中選取高度抗病和感病株系各4份,對(duì)其T<,1>代植株分別進(jìn)行卡那霉素抗性鑒定、PCR檢測(cè)和PVY<'N>抗病性鑒定.4.高度抗病株系M13 T<,0>、T<,1>代卡那霉素抗性鑒定、抗病性鑒定和Sout

3、hen blot分析表明,T<,1>代與T<,0>代相比,卡那霉素抗性和抗病性分離較小,分別為2.1﹪和6.2﹪.T<,1>代雜交帶型和拷貝數(shù)有較大分離,但多數(shù)仍為多拷貝,表現(xiàn)高度抗病.5.單嫁接實(shí)驗(yàn)表明,PVY CP介導(dǎo)的抗病性并不能從高度抗病砧木傳到上部轉(zhuǎn)基因感病接穗或未轉(zhuǎn)基因的接穗.6.雙嫁接試驗(yàn)證明,PVY<'N>病毒可以跨越一段較長(zhǎng)的(可達(dá)42cm)高度抗病植株的莖傳遞到未轉(zhuǎn)基因的接穗中并引起癥狀,中部高度抗病植株不產(chǎn)生癥狀,