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文檔簡介
1、目的:為了更好地模擬體內(nèi)成骨微環(huán)境,建立一種安全的體外誘導干細胞定向誘導分化的新體系,SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞與包埋在海藻酸鈉-聚賴氨酸-海藻酸鈉(alginate-poly-lysine-alginate,APA)微膠囊中的SD大鼠成骨細胞進行體外共培養(yǎng)。
方法:首先利用流式細胞儀分析了SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的表型,然后進行了向成骨、脂肪多向誘導分化鑒定。第3代成骨細胞被包埋在直徑400微米的APA微膠囊中,之后含有成
2、骨細胞的微膠囊和外部的干細胞進行共培養(yǎng),初始成骨細胞和干細胞的數(shù)量比約為10:1。共培養(yǎng)之后,通過堿性磷酸酶(ALP)以及vonKossa染色來評價骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細胞定向分化的程度。
結(jié)果:實驗結(jié)果表明骨髓間充質(zhì)干細胞表達CD45-和CD29+,并具有向成骨和脂肪的多向分化能力。在體外微囊化共培養(yǎng)數(shù)周后,ALP定性和定量分析以及vonKossa染色證實微囊化成骨細胞能夠體外促進骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細胞定向分化。<
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