載DNA疫苗殼聚糖納米膠囊的研究.pdf

1、本文選用從甲殼類動(dòng)物中提取的天然無毒、可生物降解、具有良好生物相容性的帶正電荷高分子材料-殼聚糖作為載體，制備了載DNA疫苗的殼聚糖-DNA疫苗納米粒。系統(tǒng)地研究了殼聚糖分子量，N/P，pH值，制備方法等因素對(duì)殼聚糖-DNA疫苗納米粒的形態(tài)、包埋率、載藥率、基因藥物在模擬體內(nèi)環(huán)境下的釋放的影響。以優(yōu)化殼聚糖-DNA疫苗納米粒的制備條件，探討制備條件與殼聚糖-DNA疫苗納米粒的性質(zhì)相關(guān)性，進(jìn)而揭示殼聚糖-DNA疫苗納米粒作為基因治療的載體

2、的機(jī)理所在。 殼聚糖的結(jié)晶性、力學(xué)特性、通透性等都和殼聚糖分子量大小相關(guān)，而殼聚糖的許多獨(dú)特功能只有在分子量降低到一定程度時(shí)才表現(xiàn)出來。因此，選擇適當(dāng)?shù)姆椒▽?duì)殼聚糖進(jìn)行降解就顯得尤為重要。本文選用超聲波與H<,2>O<,2>氧化降解和微波技術(shù)與H<,2>O<,2>氧化降解的方法對(duì)殼聚糖進(jìn)行降解以獲得純化的不同分子量的殼聚糖。結(jié)果表明：采用降解體系為4％的殼聚糖的5％乙酸溶液，加入最終濃度5％H<,2>O<,2>，進(jìn)行超聲波輔助降

3、解80min或微波降解8min可獲得較滿意的結(jié)果。 殼聚糖分子荷正電，DNA疫苗分子荷負(fù)電，我們利用這一特點(diǎn)采用復(fù)凝聚法制備疫苗殼聚糖納米粒。以納米粒的平均粒徑與形態(tài)作為控制指標(biāo)，進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)。從納米粒的粒徑分布、形態(tài)、包埋率、載藥率、疫苗包埋量和體外釋放率等方面考察了納米粒的基本性質(zhì)。結(jié)果表明：采用復(fù)凝聚制備法能夠?qū)崿F(xiàn)殼聚糖對(duì)DNA疫苗的包埋，包埋率達(dá)到83.46％。制備的殼聚糖DNA疫苗納米粒呈亞球型，粒徑在300～600