轉(zhuǎn)染攜帶BMP2腺病毒的鼠肌母細(xì)胞異位成骨能力的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景及目的：
　　 有相關(guān)調(diào)查表明5％到10％的骨折病人發(fā)生延遲愈合或愈合不理想。這些不愈合的骨折通常發(fā)生于距骨頸和舟狀骨折、感染、暴力損傷和骨質(zhì)疏松的病人。對(duì)于此類(lèi)的骨折,目前治療措施通常有自體骨移植、帶血管的骨移植、添加骨蛋白的異體骨移植等。通常愈后較差,且供骨區(qū)常發(fā)生感染和骨缺損等并發(fā)癥。本課題立足于尋求一種表達(dá)BMP2能力高、取材方便且對(duì)機(jī)體創(chuàng)傷小的細(xì)胞載體,并將其用于臨床,以尋求一種可替代、且行之有效的微創(chuàng)基因療法

2、來(lái)促進(jìn)上述骨不連或延遲愈合的恢復(fù)。
　　 方法：
　　 建立相應(yīng)幾組的小鼠模型,80只C3H小鼠分為4組:按分組要求將移植物注入小鼠腓腸肌肌腹,轉(zhuǎn)染Ad-BMP2的肌母細(xì)胞組(A組)、轉(zhuǎn)染Ad-LacZ的肌母細(xì)胞組(B組),注入空白肌母細(xì)胞組(C組),注入等劑量Ad-BMP2組(D組),術(shù)后每周(連續(xù)3次)觀(guān)察各組小鼠注射區(qū)的組織學(xué)變化情況及各組小鼠模型處的放射學(xué)表現(xiàn)。
　　 結(jié)果：
　　 (1)間接免疫

3、熒光:Ad-BMP2轉(zhuǎn)染的肌母細(xì)胞中BMP-2陽(yáng)性細(xì)胞多見(jiàn),未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,未觀(guān)察到陽(yáng)性細(xì)胞,僅見(jiàn)微弱的背景染色。(2)ALP活性:空白肌母細(xì)胞和轉(zhuǎn)染Ad-LacZ的肌母細(xì)胞的ALP活性含量極低,Ad-BMP2轉(zhuǎn)染組中ALP活性含量較高。(3)4組動(dòng)物模型骨折愈合的影像學(xué)表現(xiàn):只有A組小鼠模型處有明確的異位成骨灶出現(xiàn)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)構(gòu)建的Ad-BMP2腺病毒能高效轉(zhuǎn)染小鼠肌母細(xì)胞,且轉(zhuǎn)染后的肌母細(xì)胞能在機(jī)體持