AcSDKP對體外培養(yǎng)條件下小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長的影響.pdf

1、湖南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文AcSDKP對體外培養(yǎng)條件下小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長的影響姓名：李燁申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：汪保和20040401摘要N一乙酰一絲一天冬一賴一脯氨酸(AcSDKP)是一種生理性調(diào)節(jié)因子，它抑制造血干／祖細(xì)胞和其它細(xì)胞的增殖。該小分子肽能阻止細(xì)胞進(jìn)入S期，使之滯留在G。／G1期。這種抑制作用是完全可逆和非毒性的。骨髓闖充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)被認(rèn)為是骨和骨髓內(nèi)幾種細(xì)胞譜系的共同前體細(xì)胞，這些譜系包括成骨

2、細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和造血支持基質(zhì)。骨髓Msc本身也參與了造血微環(huán)境的組成及功能。本文的工作假說是AcSDKP對MSc的生長可能有調(diào)節(jié)作用。我們進(jìn)行體外細(xì)胞克隆試驗和采用有關(guān)實驗技術(shù)，研究了AcSD時對小鼠骨髓MSC生長的影Ⅱ向。本研究所獲結(jié)果為我們的假說提供了支持。體外培養(yǎng)條件下，AcSDKP使小鼠骨髓MSC集落的生成數(shù)和大小顯著減?。蛔畲笮?yīng)濃度為lxl0_12mol／L，無論其濃度下降或上升，效應(yīng)都減低；在濃度Nlxl0叫om

3、ol／L干1]1x10“4mol／L時，抑制效應(yīng)明顯減弱或消失：量效關(guān)系曲線是雙相的。四甲基偶氮唑鹽法(MTT法)的檢測結(jié)果進(jìn)一步證明了AcSDKP能劑量依賴性地抑制小鼠骨髓MSC的生長。AcSDKP在同樣的MSC培養(yǎng)體系中作用72h被撤除后，MSC集落數(shù)明顯恢復(fù)，隨著AcSDKP的作用時間縮短而MSC集落數(shù)恢復(fù)程度增加，說明AcSDKP對MSC生長的抑制作用是可逆的。然而，即使作用時間縮短至12h集落數(shù)仍明顯少于不加AcSDKP對照組

4、，意味著該四肽因子可能對MSC的貼壁能力有抑制作用。在血清濃度為10％～30％的培養(yǎng)條件下，AcSDKP顯著減少MSC集落生成數(shù)，但血清濃度為40％時沒有這樣的效應(yīng)，這提示AcsDKP能阻斷血清所含細(xì)胞生長刺激因子的作用，而抑帛OMSC集落的生成。總之，本研究首次獲得AcSDKP在體外培養(yǎng)條件下抑制骨髓MSC生長的實驗結(jié)果，并且這種抑制效應(yīng)具有雙相的劑量依賴性、時間依賴性以及可逆性。AcSDKP阻斷細(xì)胞生長刺激因子的作用可能是其抑制骨髓