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文檔簡介
1、近些年,大量實驗和臨床研究證實炎性小體在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。免疫微環(huán)境與骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndromes,MDS)的進(jìn)展有密切關(guān)系,亦有研究顯示基因因素在MDS的易感性中起重要作用,但是關(guān)于炎性小體信號通路基因多態(tài)性與MDS易感性的研究尚未見報道。因此,本研究中我們選取了NLRP3炎癥小體信號通路中的五個炎性分子,檢測其基因多態(tài)性并分析其與MDS易感性的關(guān)系。同時,我們進(jìn)一步研究了炎性分子基
2、因多態(tài)性與MDS患者臨床特征間的關(guān)系。
目的:
1.分析NLRP3炎癥通路相關(guān)分子NLRP3、IL-1β、IL-18、CARD8、NF-κB的基因多態(tài)性與MDS發(fā)生的相關(guān)性。
2.探討NLRP3炎癥通路相關(guān)分子的基因多態(tài)性與MDS的臨床及實驗室特征間的關(guān)系。
方法:
1.研究對象為2014年1月至2015年12月就診于山東大學(xué)齊魯醫(yī)院血液科的按WHO分型診斷標(biāo)準(zhǔn)確診的133例MDS患者,
3、以96例無血液系統(tǒng)疾病的健康人群作為正常對照組;
2.根據(jù)基因已知多態(tài)性位點(diǎn)[NLRP3-Q750K(rs35829419),IL-1β(rs16944), IL-18(rs1946518), CARD8-C10X(rs2043211), NF-κB-94(rs28362491)]序列設(shè)計探針引物,以基因組DNA為模板,用PCR方法擴(kuò)增目的片斷;
3.結(jié)果用7500 Fast Real-Time PCR System
4、(Applied Biosystems)進(jìn)行分析,用Sequence Detection System(SDS)分析基因型;
4.比較NLRP3、IL-1β、IL-18、CARD8、NF-κB的基因多態(tài)性與MDS發(fā)生的相關(guān)性。
5.分析NLRP3、IL-1β、IL-18、CARD8、NF-κB的基因多態(tài)性與MDS臨床及實驗室特征間的關(guān)系。
結(jié)果:
1.本研究構(gòu)建了NLRP3-Q750K(rs358
5、29419),IL-1β(rs16944),IL-18(rs1946518),CARD8-C10X(rs2043211),NF-κB-94(rs28362491)基因的探針,對133例MDS患者和96例正常對照進(jìn)行了Taqman探針分析。
2.133例確診的MDS患者中男女比例為1.18,中位年齡為54歲(16-95歲),96例正常對照中男女比例為1.13,中位年齡為42歲(17-85歲)。MDS組與正常對照組在年齡與性別上均
6、無統(tǒng)計學(xué)意義。133例MDS患者按照WHO分型:環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞性貧血(refractory anemia with ringed side,RARS)11例,難治性細(xì)胞減少單系增生異常(refractory cytopenia with unilineagedysplasia,RCUD)20例,MDS未確定型(MDS unclassified,MDS-U)7例,難治性細(xì)胞減少多系增生異常及難治性細(xì)胞減少多系增生異常伴環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞[RC
7、MD(RS)]60例,難治性貧血伴原始細(xì)胞增多1型(refractory anemia with excess blasts-1,RAEB-1)9例,單獨(dú)的5q-綜合征2例,難治性貧血伴原始細(xì)胞增多2型(refractory anemia with excessblasts-1/2, RAEB-2)24例。
3.與正常對照比較,IL-1β(rs16944)-GG多態(tài)性與MDS的發(fā)生有密切關(guān)聯(lián)OR=2.20,CI(1.0-4.7
8、),未發(fā)現(xiàn)其他四個基因多態(tài)性與MDS易感性相關(guān)。我們進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)IL-1β(rs16944)-GG多態(tài)性更常見于WHO分型中的RCMD(RS)和RAEB-1/2、染色體核型分析中的復(fù)雜核型以及IPSS危險評分中的高危組患者,而在染色體核型分析中的+8、-20q中較少見。同時我們發(fā)現(xiàn)IL-1β(rs16944)-GG基因型的MDS患者的血紅蛋白水平低于其他基因型的患者。
結(jié)論:
(1)IL-1β(rs16944)-G
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