ALA-LA對糖損傷HK-2細(xì)胞和DN db-db小鼠的作用及機制探討.pdf

1、目的：⑴選擇必需脂肪酸α-亞麻酸/亞油酸(ALA/LA)，干預(yù)人腎近曲小管上皮細(xì)胞(HK-2細(xì)胞)高糖損傷模型，闡明ALA/LA對糖損傷HK-2細(xì)胞的體外保護(hù)作用及其機制；⑵探明ALA/LA對糖尿病腎病(DN) db/db小鼠的各種生物學(xué)效應(yīng)，闡明ALA/LA對DN db/db小鼠的體內(nèi)保護(hù)作用及其可能的機制；⑶通過離體和在體實驗，闡明DN發(fā)展過程中，ALA/LA對腎臟炎性水平、氧化應(yīng)激以及腎小管纖維化等方面的作用及可能機制，為應(yīng)用AL

2、A/LA防治DN，提供實驗積累和應(yīng)用基礎(chǔ)。
　　方法：①高糖刺激建立HK-2細(xì)胞糖損傷模型和db/db小鼠DN模型；②生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、病理生理學(xué)方法，觀察ALA/LA的生物學(xué)效應(yīng)。
　　結(jié)果：⑴ALA/LA干預(yù)組HK-2細(xì)胞對葡萄糖的吸收能力高于對照組(p＜0.05)，干預(yù)組細(xì)胞因子水平和氧化應(yīng)激損傷以及細(xì)胞凋亡率低于高糖模型組(p＜0.05)；⑵ALA/LA干預(yù)組HK-2細(xì)胞TGF-β1、p38mRNA以

3、及TGF-β1、p-p38蛋白表達(dá)量均顯著低于高糖模型組(p＜0.05)；⑶經(jīng)ALA/LA干預(yù)后，干預(yù)組db/db小鼠空腹血糖、腎功能指標(biāo)、炎癥因子、氧化應(yīng)激水平以及腎臟病理形態(tài)學(xué)損傷程度均低于高糖模型組(p＜0.05)；⑷ALA/LA干預(yù)組db/db小鼠腎臟TGF-β1、 p38、ERK和COLⅣmRNA和TGF-β1、 p-p38、p-ERK和COLⅣ蛋白表達(dá)量均顯著低于高糖模型組(p＜0.05)。
　　結(jié)論：①體外實驗表明，