Mibefradil對(duì)db-db鼠的降糖作用及其機(jī)制初步研究.pdf

1、研究背景:
　　糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一組因長(zhǎng)期慢性高血糖導(dǎo)致機(jī)體外周組織胰島素敏感性降低,伴或不伴胰島β細(xì)胞合成胰島素能力缺陷的內(nèi)分泌性疾病?，F(xiàn)有許多研究證實(shí)糖尿病患者存在細(xì)胞內(nèi)鈣離子調(diào)節(jié)紊亂,新近研究表明,胰島β細(xì)胞屬電興奮性細(xì)胞,β細(xì)胞膜ATP依賴的鈣通道及鉀通道是影響胰島素分泌的重要離子通道,在人類(lèi)和嚙齒類(lèi)動(dòng)物中鈣離子通道影響葡萄糖誘導(dǎo)胰島素分泌水平。鈣離子通道阻滯劑是一種通過(guò)阻斷細(xì)胞膜鈣離子

2、通道,抑制胞外的鈣離子內(nèi)流,使胞內(nèi)鈣離子水平降低,繼而調(diào)節(jié)靶器官功能的藥物。目前,已有少數(shù)關(guān)于L型鈣離子通道阻滯劑對(duì)糖尿病影響的報(bào)道,但尚未有將T型鈣離子通道阻滯劑應(yīng)用于糖尿病模型,對(duì)其降糖作用的研究報(bào)道。本研究擬利用T型鈣離子通道阻滯劑Mibefardil、NNC55-0396以及L型鈣離子通道阻滯劑nicardipine分別干預(yù)db/db鼠,觀察對(duì)比其降糖效果,并深入了解Mibefardil對(duì)糖代謝相關(guān)指標(biāo)及T型鈣離子通道特異性亞基

3、Cav3.1及Cav3.2的表達(dá),并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。
　　方法:
　　取8W鼠齡雄性野生型小鼠及db/db鼠各24只,分別按隨機(jī)法分為4組(共8組):野生安慰劑組、野生Mibefradil干預(yù)組、野生NNC干預(yù)組、野生nicardipine干預(yù)組、db/db安慰劑組、db/db Mibefradil干預(yù)組、db/dbNNC干預(yù)組及db/db nicardipine干預(yù)組(n=6)。Mibefradil與NNC組予3

4、0mg/(kgd)劑量,nicardipine組予25mg/(kgd)劑量,安慰劑組予等體積生理鹽水,均腹腔注射,分早晚兩次給藥,干預(yù)1周;比較實(shí)驗(yàn)動(dòng)物藥物干預(yù)前后血糖、體質(zhì)量、平均血壓、心率及ITT的變化。重點(diǎn)觀察Mibefradil干預(yù)后胰島素、糖化血紅蛋白及總膽固醇的變化水平,并用免疫組織化學(xué)法及Western-Blot檢測(cè)T型鈣通道特異性亞基Cav3.1及Cav3.2表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　(1)與db/db安慰

5、劑組相比,藥物干預(yù)后,db/dbMibefradil組及db/db NNC干預(yù)組空腹血糖水平顯著下降(P<0.01),其中,Mibefradil早于NNC產(chǎn)生降糖作用,且效果更明顯;db/db nicardipine組無(wú)明顯差異(P>0.05);而野生安慰劑組和野生藥物干預(yù)各組之間均無(wú)明顯差異(均P>0.05);
　　(2)與db/db安慰劑組相比,藥物干預(yù)后,db/db Mibefradil組及db/dbNNC干預(yù)組均體質(zhì)量明顯

6、下降(P<0.05),Mibefradil早于NNC產(chǎn)生作用;db/db nicardipine組無(wú)明顯差異(P>0.05);而野生安慰劑組和野生藥物干預(yù)各組之間均無(wú)明顯差異(均P>0.05);
　　(3)與db/db安慰劑組比較,藥物干預(yù)后,db/db Mibefradil組24h攝食量、基礎(chǔ)胰島素、糖化血紅蛋白、膽固醇水平均明顯下降(均P<0.05);而野生安慰劑組和野生Mibefradil組均無(wú)明顯差異(均P>0.05);<