反映PCOS患者代謝特點(diǎn)的動(dòng)物模型比較及PPARs表達(dá)研究.pdf

1、目的:在總結(jié)多囊卵巢綜合征(PCOS)患者糖脂代謝與性激素變化特點(diǎn)的基礎(chǔ)上，對(duì)比改良Poretsky法、來曲唑灌胃法建立的PCOS動(dòng)物模型，判斷哪種與PCOS患者的代謝及性激素特點(diǎn)更接近;分析過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARs)的三種亞型PPARα、β、γ在優(yōu)選動(dòng)物模型卵巢組織上的表達(dá)情況，探討三種亞型的異常表達(dá)與PCOS代謝異常的相關(guān)性。
　　方法:采用2011年國家衛(wèi)生部發(fā)布的PCOS診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷，收集2016年5月至

2、2018年2月間大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院婦科門診及內(nèi)分泌門診初診的PCOS患者33例，記錄身高、體重、腰圍、臀圍、腰臀比，用電化學(xué)發(fā)光法測定患者血清中糖代謝指標(biāo)（空腹血糖、空腹胰島素、胰島索抵抗指數(shù)）、脂代謝指標(biāo)（三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白）及性激素（睪酮、雌二醇、孕酮、促黃體生成素、卵泡刺激素）水平。以體檢健康的女性30例為對(duì)照組，同時(shí)檢測并記錄上述指標(biāo)。分析多囊卵巢綜合征患者糖、脂代謝特點(diǎn)和性激素水平的變化特點(diǎn)。

3、r>　　采用改良Poretsky法（A組）建立PCOS大鼠模型:選用SD大鼠，給予諾和靈N每次2.0IU頸部皮下注射，21天的實(shí)驗(yàn)周期中每日一次，同時(shí)給予飲用5％葡萄糖溶液;第11天到第21天期間，每天兩次皮下注射3.0IU的HCG;采用來曲唑組灌胃法（B組）建立PCOS大鼠模型:將來曲唑溶解在1％羥甲基纖維素水溶液（CMC2ml/kg），SD大鼠給予來曲唑灌胃21天，每次1mg/kg，每日一次。空白對(duì)照組（C組）:SD大鼠每日給予正常

4、食、水。通過陰道涂片觀察各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)情周期變化，測量大鼠體重、大鼠卵巢重量;通過卵巢組織切片觀察大鼠排卵及卵泡改變情況;采用ELISA方法測定促黃體生成素(LH)，卵泡刺激素(FSH)，睪酮(T)，孕激素(P)，雌二醇(E2)，空腹血糖(FPG)，空腹胰島素(FINS)，三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、總膽固醇(TC)，并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)等指標(biāo);采用免疫組化法分別檢測PPA

5、Rs三種亞型在改良Poretsky組及對(duì)照組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物卵巢組織中的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:本研究中，PCOS患者組33例患者中體重正常者占69.7％(23/33)，超重或肥胖占30.3％(10/33)，無低體重者;合并胰島素抵抗者占90.9％(30/33)，發(fā)生糖耐量減低及糖尿病的概率分別為27.27％(9/33)和3.03％(1/33);血脂異常發(fā)病率為15.15％，MS發(fā)病率為3.03％(1/33)。
　　PCOS患者組T、

6、LH水平、LH/FSH比值較正常對(duì)照組升高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);FSH較正常對(duì)照組降低且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);PCOS患者組FPG、FINS、HOMA-IR、TG較對(duì)正常照組升高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);E2、P、TC、LDL-C水平與正常對(duì)照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:(1)與空白對(duì)照組相比，來曲唑組和改良Poretsky組均出現(xiàn)大鼠體重、卵巢質(zhì)量增加

7、，其中改良Poretsky組卵巢質(zhì)量增加更為明顯。(2)來曲唑組大鼠T、FINS、HOMA-IR水平高于空白對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但LH、FSH、E2、P值、LH/FSH比值、FPG較空白對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。改良Poretsky組大鼠T、LH水平、LH/FSH比值、FPG、FINS、HOMA-IR、TG均明顯高于空白對(duì)照組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，F(xiàn)SH較空白對(duì)照組降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

8、意義(P＜0.05)。E2、P水平較空白對(duì)照組升高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。(3)卵巢組織HE染色提示改良Poretsky組和來曲唑組均出現(xiàn)卵巢多囊樣改變，卵泡腔呈囊性增大，顆粒細(xì)胞層數(shù)減少。(4)免疫組化檢測結(jié)果顯示，PPARα、PPARβ、PPARγ三種亞型在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物卵巢組織中均有表達(dá)，與空白對(duì)照組相比，改良Poretsky組大鼠卵巢組織PPARγ、α表達(dá)上調(diào)。
　　結(jié)論:1.本研究中PCOS患者肥胖、糖耐量受損、糖

9、尿病、血脂異常、代謝綜合征的發(fā)病率較正常對(duì)照組升高，性激素T、LH、LH/FSH水平較正常對(duì)照組升高，F(xiàn)SH較正常對(duì)照組降低，其變化與目前文獻(xiàn)及相關(guān)指南報(bào)道的結(jié)果相近。
　　2.改良Poretsky法誘導(dǎo)的大鼠模型其代謝及性激素特點(diǎn)與PCOS患者代謝及性激素變化特點(diǎn)更相似，作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)選的造模方法。
　　3.PPARs三種亞型中有兩種（PPARγ、PPARα）在改良Poretsky法誘導(dǎo)的大鼠模型卵巢組織中與對(duì)照組相比均呈