飲水型鉛中毒對兔膝關節(jié)軟骨影響的研究.pdf

1、目的：
　　 1.觀察慢性飲水型鉛中毒時，新西蘭兔血液、骨、滑膜及關節(jié)軟骨中的鉛含量及分布特點；
　　 2.觀察慢性飲水型鉛中毒對新西蘭兔膝關節(jié)軟骨形態(tài)學及關節(jié)軟骨組成成分基因表達的影響。
　　 方法：取新西蘭兔40只，雌雄不限，隨機分為實驗組和對照組，每組20只。對照組給予正常飲用水飼養(yǎng)；實驗組給予含醋酸鉛（1g/L）飲用水飼養(yǎng)，共飼養(yǎng)3個月，飼養(yǎng)期內(nèi)觀察各組動物精神狀態(tài)及體重的變化情況。隨機抽取每組14只動物

2、，心臟采血，測定血鉛含量；取右膝上1cm 處的股骨，測定骨中的鉛含量；取雙膝滑膜，測定滑膜中的鉛含量；取雙膝關節(jié)軟骨，測定關節(jié)軟骨中的鉛含量。隨機抽取每組3只動物，切取雙側完整膝關節(jié)，大體觀察軟骨及滑膜的形態(tài)，并行組織脫鈣包埋切片，行軟骨HE、番紅O及甲苯胺蘭染色，光鏡觀察，行軟骨Mankin組織學標準評分，行滑膜HE 染色并行病理學炎癥分級。隨機抽取每組3只動物，取股骨髁負重區(qū)關節(jié)軟骨，透射電鏡觀察軟骨細胞及其線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞

3、器的形態(tài)和細胞外基質(zhì)中膠原纖維的走行及分布，取余關節(jié)軟骨應用實時定量RT-PCR 法定量檢測軟骨中II 型膠原和糖胺多糖的mRNA表達量。
　　 結果：
　　 1.對照組體重增加呈上升趨勢；實驗組動物較對照組體重增長緩慢，增長曲線較平直，從染鉛第4周開始體重增加落后于對照組(P<0.05)，并始終維持在較低水平(P<0.05)。
　　 2.與對照組相比，實驗組血液、骨、滑膜及關節(jié)軟骨中的鉛含量均明顯增加（P<0.

4、01）。實驗組鉛含量以骨內(nèi)最高，其次為滑膜、關節(jié)軟骨和血液。關節(jié)軟骨中的鉛含量與血液、骨及滑膜中的鉛含量均呈線性正相關（P<0.01）。
　　 3.實驗組關節(jié)軟骨、滑膜等大體觀察與對照組相比未見明顯差別，關節(jié)軟骨表面光滑，有光澤；滑膜未見充血和腫脹；HE染色光鏡觀察發(fā)現(xiàn)，實驗組關節(jié)軟骨細胞減少；番紅O及甲苯胺藍染色，均證實深層基質(zhì)染色較正常軟骨變淺。軟骨的Mankin評分及滑膜炎癥分級實驗組均較對照組高（P<0.05）。透射電鏡

5、進一步證實，實驗組軟骨細胞形狀不規(guī)則，胞膜邊界尚清且出現(xiàn)不連續(xù)現(xiàn)象，胞漿線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞器腫脹和崩解，可見大的空泡，胞核變形；實驗組較對照組細胞周圍膠原纖維稀疏，未見明顯的網(wǎng)格狀排列。
　　 4.實驗組兔膝關節(jié)軟骨中Ⅱ型膠原的mRNA表達量較對照組顯著減少（P<0.05）；關節(jié)軟骨中糖胺多糖的mRNA表達量較對照組顯著減少（P<0.05）。
　　 結論：
　　 1．慢性飲水型鉛中毒時鉛在血液、骨、滑膜及關節(jié)軟