Bim在胞質(zhì)M-CSF抑制乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡中的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：探討B(tài)im對(duì)轉(zhuǎn)染胞質(zhì)巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF）人乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡的影響及PI3K/Akt/FoxO3a信號(hào)通路在其中的作用。
　　方法：以胞質(zhì)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染M-CSF的 MCF-7細(xì)胞系為研究對(duì)象。采用Western blotting檢測(cè)M-CSF、PI3K/Akt/FoxO3a信號(hào)通路蛋白及Bim、MST1的表達(dá)。流式細(xì)胞術(shù)、Hoechst33258染色檢測(cè)細(xì)胞的凋亡率；免疫熒光和Western blotting

2、檢測(cè)FoxO3a的亞細(xì)胞定位。
　　結(jié)果：
　　1、胞質(zhì)M-CSF下調(diào)MCF-7細(xì)胞MST1、Bim的表達(dá)（p<0.05）；胞質(zhì)M-CSF可降低MCF-7細(xì)胞凋亡率。
　　2、胞質(zhì)M-CSF下調(diào)MCF-7細(xì)胞胞核FoxO3a的表達(dá)（p<0.05），上調(diào)胞質(zhì)FoxO3a的表達(dá)（p<0.05），并促使FoxO3a向胞質(zhì)轉(zhuǎn)位。
　　3、胞質(zhì)M-CSF上調(diào)MCF-7細(xì)胞p-MST1、p-FoxO3a的表達(dá)（p<0.05）

3、；PI3K抑制劑LY294002逆轉(zhuǎn)胞質(zhì)M-CSF誘導(dǎo)的Bim、MST1表達(dá)的下調(diào)及凋亡率的降低（p<0.05），促進(jìn)FoxO3a向胞核的易位。
　　4、MST1-siRNA沉默MST1的表達(dá)，促進(jìn)FoxO3a S253位點(diǎn)的磷酸化（p<0.05），并進(jìn)一步下調(diào)Bim的表達(dá)（p<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、胞質(zhì)M-CSF通過下調(diào)Bim的表達(dá)抑制乳腺癌MCF-7細(xì)胞的凋亡。
　　2、FoxO3a蛋白的核內(nèi)外遷