靈芝硒多糖誘導(dǎo)乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡過程中的抗拉化作用.pdf

1、硒是一種人體必需的微量元素,許多疾病比如癌癥、心血管病等都與體內(nèi)缺硒有關(guān)。在硒的諸多生物功能中,硒的抗癌作用一直被人們廣泛關(guān)注。硒化合物的存在形式包括有機(jī)硒和無機(jī)硒兩種,有機(jī)硒主要包括硒多糖、硒蛋白等,無機(jī)硒主要包括硒酸和亞硒酸。盡管無機(jī)硒化合物被認(rèn)為是有效的化學(xué)防癌藥物,但是有機(jī)硒因其低毒性而倍受關(guān)注。靈芝硒多糖作為一種有機(jī)硒化合物,兼具硒和多糖的功能,并且其生理功能普遍高于硒和多糖,更利于機(jī)體吸收。
　　 本論文以實(shí)驗(yàn)室前期

2、通過靈芝加硒培養(yǎng),分離純化后得到的具有抗癌活性組分靈芝硒多糖SeGLP-2B-1為實(shí)驗(yàn)材料。將靈芝硒多糖SeGLP-2B-1作用于乳腺癌MCF-7細(xì)胞,作用濃度分別為0.0225μM、0.045μM、0.09μM、0.18μM、0.27μM、0.36μM、0.45μM、0.54μM、0.64μM,作用時(shí)間為1-72h,并且設(shè)置陰性對(duì)照組,通過MTT法測(cè)定其對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。得到在48h、72h的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為0.26

3、4μM、0.246μM。使用DCFH-DA熒光探針測(cè)定0.27μM的靈芝硒多糖誘導(dǎo)乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡的過程中,1-72h內(nèi)細(xì)胞活性氧含量變化,同時(shí)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化物丙二醛(MDA)變化。為了探索活性氧在細(xì)胞凋亡中的影響,我們測(cè)定了0.27μM靈芝硒多糖誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡時(shí),1h、3h、6h、8h、24h、48h、72h這7個(gè)時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞內(nèi)的主要抗氧化酶CAT、SOD、GSH-Px的含量變化,進(jìn)一步研究硒多糖誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用中的氧化應(yīng)激

4、機(jī)制。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,靈芝硒多糖SeGLP-2B-1對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7的生長(zhǎng)具有抑制作用,隨著靈芝硒多糖作用時(shí)間的增加,其對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率增強(qiáng),并且這種抑制效果也和作用濃度呈正相關(guān)。采用DCFH-DA熒光探針標(biāo)記,檢測(cè)到隨著靈芝硒多糖作用時(shí)間的增加,硒的抗氧化作用增強(qiáng),細(xì)胞內(nèi)活性氧ROS含量降低,在72h檢測(cè)到ROS含量到達(dá)最低值。并且對(duì)作為細(xì)胞內(nèi)活性氧水平的另一個(gè)指標(biāo)的氧化應(yīng)激脂質(zhì)過氧化分解產(chǎn)物丙二醛(MDA)EL