不同孕激素對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的:探討不同孕激素對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的影響及可能機(jī)制，并為臨床激素替代治療合理選擇用藥種類及用藥方案提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:體外培養(yǎng)兩種乳腺癌細(xì)胞系， MCF-7細(xì)胞系(ER+、PR+)和MDA-MB-231細(xì)胞系(ER-、PR-)，應(yīng)用不同濃度(10-8M，10-7M，10-6M，10-5M)的不同孕激素(天然黃體酮、醋酸甲羥孕酮、左炔諾酮、炔諾酮、屈螺酮、地屈孕酮、醋酸甲地孕酮、諾美孕酮、去氧孕烯、醋酸環(huán)丙孕酮)及不同濃度(

2、10-14M，10-12M，10-10M，10-8M，10-6M)雌激素(17β-E2)對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞和MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行單獨(dú)刺激、連續(xù)聯(lián)合刺激及序貫刺激，采用雌激素受體拮抗劑氟維司群(FUL)和孕激素受體拮抗劑米非司酮(RU486)與雌孕激素單獨(dú)或聯(lián)合刺激細(xì)胞，應(yīng)用MTT法檢測(cè)各個(gè)刺激實(shí)驗(yàn)中兩種乳腺癌細(xì)胞系的增殖情況，單純DMEM培養(yǎng)液組為陰性對(duì)照組。將各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果輸入Spss19.0統(tǒng)計(jì)軟件包內(nèi)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，

3、以了解不同孕激素及雌激素、不同激素刺激方案及加用雌孕激素受體拮抗劑對(duì)兩種細(xì)胞增殖的影響。
　　結(jié)果:
　　1、不同孕激素單獨(dú)刺激MCF-7細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示：屈螺酮(DRSP)及去氧孕烯(DSG)在10-7M濃度時(shí)增殖率分別為117.71％±1.55%及112.24%±4.32%，10-6M時(shí)增殖率為120.77%±2.71%及119.35%±2.91%，與陰性對(duì)照組相比均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，炔諾酮(NET)在10-

4、7M時(shí)增殖率為103.70%±3.08%，與陰性對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，10-6M濃度增殖率約為110.00%±2.49%，與陰性對(duì)照組相比具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。而DRSP、NET、DSG在10-5M時(shí)與陰性對(duì)照組相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。醋酸甲羥孕酮(MPA)、天然黃體酮(P4)、諾美孕酮(NOM)、醋酸環(huán)丙孕酮(CYP)、醋酸甲地孕酮(MA)、地屈孕酮(DYD)及左炔諾孕酮(LNG)各濃度對(duì)細(xì)胞的增殖率與陰性對(duì)照組相比均無(wú)統(tǒng)

5、計(jì)學(xué)差異。
　　2.、雌激素對(duì)MCF-7細(xì)胞單獨(dú)刺激實(shí)驗(yàn)顯示：10-14M、10-12M的17β-E2對(duì)細(xì)胞無(wú)增殖作用，10-10M時(shí)增殖率為111.97%±5.41%，10-6M時(shí)增殖率為108.20%±4.04%，與陰性對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。10-8M時(shí)增殖率為118.57%±6.01%，與陰性對(duì)照組相比具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。
　　3、低濃度17β-E2與不同孕激素序貫方案刺激MCF-7

6、細(xì)胞的增殖率較聯(lián)合方案低，但二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4、受體阻斷劑實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示雌孕激素刺激時(shí)加入雌激素受體拮抗劑氟維司群(FUL)組及加入兩種受體拮抗劑組對(duì) MCF-7細(xì)胞的增殖率與陰性對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而加入孕激素受體拮抗劑米非司酮(RU486)組的增殖率仍高于陰性對(duì)照組，其差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　5、對(duì)于MDA-MB-231細(xì)胞系，無(wú)論是雌孕激素單獨(dú)刺激還是聯(lián)合及序貫刺激，與陰性對(duì)照組相比，增殖率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差

7、異。
　　結(jié)論:
　　1、雌激素刺激MCF-7乳腺癌細(xì)胞顯示在17β-E2濃度低于10-10M時(shí)無(wú)明顯增殖作用，高于10-10M時(shí)增殖作用明顯，在10-8M時(shí)達(dá)到最高，故在進(jìn)行HRT治療時(shí)應(yīng)選用最低有效作用濃度的雌激素，對(duì)乳腺相對(duì)安全。
　　2、不同孕激素對(duì)乳腺癌增殖作用不同，DRSP、DSG及NET對(duì)MCF-7細(xì)胞有明顯增殖作用，呈現(xiàn)一定的濃度依賴性，P4、NOM、MPA、CYP、MA、LNG、DYD對(duì)MCF-7無(wú)明

8、顯增殖作用。在應(yīng)用HRT添加孕激素時(shí)，孕激素種類應(yīng)當(dāng)謹(jǐn)慎選擇，盡量選用無(wú)增殖作用的P4，NOM等，盡量避免選用NET，DRSP， DSG。
　　3、雌激素拮抗劑氟維司群對(duì)雌孕激素引起MCF-7細(xì)胞增殖的阻斷作用及雌孕激素刺激對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞系的無(wú)增殖作用提示孕激素對(duì)乳腺細(xì)胞的增殖作用可能與ER有關(guān)，但具體機(jī)制尚需要進(jìn)一步研究。
　　4、雌激素序貫方案比連續(xù)聯(lián)合方案對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞的增殖作用稍低，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義