不同孕激素對乳腺癌細胞增殖的影響及機制研究.pdf

1、目的:探討不同孕激素對乳腺癌細胞增殖的影響及可能機制，并為臨床激素替代治療合理選擇用藥種類及用藥方案提供實驗依據(jù)。
　　方法:體外培養(yǎng)兩種乳腺癌細胞系， MCF-7細胞系(ER+、PR+)和MDA-MB-231細胞系(ER-、PR-)，應用不同濃度(10-8M，10-7M，10-6M，10-5M)的不同孕激素(天然黃體酮、醋酸甲羥孕酮、左炔諾酮、炔諾酮、屈螺酮、地屈孕酮、醋酸甲地孕酮、諾美孕酮、去氧孕烯、醋酸環(huán)丙孕酮)及不同濃度(

2、10-14M，10-12M，10-10M，10-8M，10-6M)雌激素(17β-E2)對MCF-7乳腺癌細胞和MDA-MB-231乳腺癌細胞進行單獨刺激、連續(xù)聯(lián)合刺激及序貫刺激，采用雌激素受體拮抗劑氟維司群(FUL)和孕激素受體拮抗劑米非司酮(RU486)與雌孕激素單獨或聯(lián)合刺激細胞，應用MTT法檢測各個刺激實驗中兩種乳腺癌細胞系的增殖情況，單純DMEM培養(yǎng)液組為陰性對照組。將各組實驗結(jié)果輸入Spss19.0統(tǒng)計軟件包內(nèi)進行統(tǒng)計分析，

3、以了解不同孕激素及雌激素、不同激素刺激方案及加用雌孕激素受體拮抗劑對兩種細胞增殖的影響。
　　結(jié)果:
　　1、不同孕激素單獨刺激MCF-7細胞實驗顯示：屈螺酮(DRSP)及去氧孕烯(DSG)在10-7M濃度時增殖率分別為117.71％±1.55%及112.24%±4.32%，10-6M時增殖率為120.77%±2.71%及119.35%±2.91%，與陰性對照組相比均有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，炔諾酮(NET)在10-

4、7M時增殖率為103.70%±3.08%，與陰性對照組相比無統(tǒng)計學差異，10-6M濃度增殖率約為110.00%±2.49%，與陰性對照組相比具有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。而DRSP、NET、DSG在10-5M時與陰性對照組相比均無統(tǒng)計學差異。醋酸甲羥孕酮(MPA)、天然黃體酮(P4)、諾美孕酮(NOM)、醋酸環(huán)丙孕酮(CYP)、醋酸甲地孕酮(MA)、地屈孕酮(DYD)及左炔諾孕酮(LNG)各濃度對細胞的增殖率與陰性對照組相比均無統(tǒng)

5、計學差異。
　　2.、雌激素對MCF-7細胞單獨刺激實驗顯示：10-14M、10-12M的17β-E2對細胞無增殖作用，10-10M時增殖率為111.97%±5.41%，10-6M時增殖率為108.20%±4.04%，與陰性對照組相比均有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。10-8M時增殖率為118.57%±6.01%，與陰性對照組相比具有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。
　　3、低濃度17β-E2與不同孕激素序貫方案刺激MCF-7

6、細胞的增殖率較聯(lián)合方案低，但二者差異無統(tǒng)計學意義。
　　4、受體阻斷劑實驗結(jié)果顯示雌孕激素刺激時加入雌激素受體拮抗劑氟維司群(FUL)組及加入兩種受體拮抗劑組對 MCF-7細胞的增殖率與陰性對照組無統(tǒng)計學差異，而加入孕激素受體拮抗劑米非司酮(RU486)組的增殖率仍高于陰性對照組，其差異有顯著性統(tǒng)計學意義。
　　5、對于MDA-MB-231細胞系，無論是雌孕激素單獨刺激還是聯(lián)合及序貫刺激，與陰性對照組相比，增殖率均無統(tǒng)計學差

7、異。
　　結(jié)論:
　　1、雌激素刺激MCF-7乳腺癌細胞顯示在17β-E2濃度低于10-10M時無明顯增殖作用，高于10-10M時增殖作用明顯，在10-8M時達到最高，故在進行HRT治療時應選用最低有效作用濃度的雌激素，對乳腺相對安全。
　　2、不同孕激素對乳腺癌增殖作用不同，DRSP、DSG及NET對MCF-7細胞有明顯增殖作用，呈現(xiàn)一定的濃度依賴性，P4、NOM、MPA、CYP、MA、LNG、DYD對MCF-7無明

8、顯增殖作用。在應用HRT添加孕激素時，孕激素種類應當謹慎選擇，盡量選用無增殖作用的P4，NOM等，盡量避免選用NET，DRSP， DSG。
　　3、雌激素拮抗劑氟維司群對雌孕激素引起MCF-7細胞增殖的阻斷作用及雌孕激素刺激對MDA-MB-231細胞系的無增殖作用提示孕激素對乳腺細胞的增殖作用可能與ER有關，但具體機制尚需要進一步研究。
　　4、雌激素序貫方案比連續(xù)聯(lián)合方案對MCF-7乳腺癌細胞的增殖作用稍低，但無統(tǒng)計學意義