TMC基因在線蟲產(chǎn)卵行為中的機(jī)制研究.pdf

1、秀麗隱桿線蟲結(jié)構(gòu)簡單，繁殖能力強(qiáng)，生長周期短，神經(jīng)系統(tǒng)簡單，其基因組已全部完成測序，是研究神經(jīng)系統(tǒng)功能和神經(jīng)環(huán)路良好的模式生物。Transmembrane channel-like gene（tmc）是一個重要的耳聾相關(guān)基因，同時也是一個未知功能基因，它的多跨膜拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)表明它可能作為受體、轉(zhuǎn)錄子、通道或離子泵起作用。目前，TMC存在諸多爭議，其中爭議最大的就是對于TMC是否作為一個通道起作用。我們希望通過對TMC功能的探究，揭示其功能，

2、為耳聾患者帶來福音。
　　在研究中，我們使用tmc-1(ok1859)以及tmc-2(ok1302)的線蟲顯性突變品系，2kb的大片段缺失導(dǎo)致它們的基因功能喪失。在體式鏡下的觀察發(fā)現(xiàn)，與野生型相比，TMC突變體線蟲不僅腹內(nèi)存卵量增加，并且腹內(nèi)存卵排布也與野生型不同，同時TMC雙突變體線蟲具有更加顯著的產(chǎn)卵缺陷表型。通過外源性添加5-HT液滴行為學(xué)，發(fā)現(xiàn)與野生型相比，tmc-1(ok1859)、tmc-2(ok1302)單突變線蟲以

3、及雙突變線蟲產(chǎn)卵減少，并在內(nèi)源性累積5-HT的液滴試驗中得到證實，由此猜測tmc-1、tmc-2突變導(dǎo)致肌肉功能部分損失。同時通過不同的啟動子介導(dǎo)tmc-1以及tmc-2的rescue實驗得到驗證。電生理和鈣成像實驗發(fā)現(xiàn)tmc-1、tmc-2突變導(dǎo)致肌肉靜息電位異常，同時通過無鈉灌流等電生理實驗結(jié)果表明TMC可能是一個背景鈉通道對肌肉起作用，而產(chǎn)生產(chǎn)卵缺陷表型。目前，NCA作為背景鈉通道的強(qiáng)有力候選，我們也做了TMC以及NCA突變品系相