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文檔簡介
1、研究目的1了解成人脂肪來源的MSC的生物學(xué)特性,細胞免疫標志及與骨髓來源的MSC進行比較;2探索在致死量照射的NOD/SCID小鼠體內(nèi)輸入單細胞來源的脂肪來源的MSC能否重建造血并在NOD/SCID小鼠分化為血液系統(tǒng)的細胞;3探索局部血管損傷后的NOD/SCID小鼠體內(nèi)輸入單細胞來源的脂肪來源的MSC能否分化為血管內(nèi)皮細胞.研究方法1體外采用液體培養(yǎng)、分離,擴增成人脂肪來源的MSC,利用極限稀釋法挑選并擴增單細胞克隆.在4-6代檢測細胞
2、生長狀態(tài),細胞周期,免疫表型及光鏡形態(tài)觀察,并與骨髓來源的MSC比較;2 NOD/SCID小鼠致死量照射后體內(nèi)輸入經(jīng)PKH26染色的脂肪來源的MSC,并輔助以G-CSF皮下注射,兩個月后病理冰凍切片分析成人脂肪來源的MSC的分布;流式細胞儀檢測PKH26和成熟血液細胞表型雙陽性的細胞;RT-PCR分析人特異性基因片段的表達;GM-CSF集落培養(yǎng)分析是否存在人源性的GM系祖細胞;3 NOD/SCID小鼠制造局部皮膚血管損傷模型,體內(nèi)輸入經(jīng)
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