Syn和GAP-43在TMT致小鼠學習記憶功能損傷及恢復過程的作用研究.pdf

1、目的：探索生產性毒物三甲基氯化錫的中樞神經系統(tǒng)毒性作用，通過一次性給予BALB/c小鼠一定劑量的TMT(i.p.)，研究TMT急性暴露對BALB/c小鼠的學習記憶損傷效應，以及這種損傷的恢復過程。通過研究海馬和額皮質中在突觸間信息傳遞過程中起重要作用的Syn和GAP-43分子表達情況，提出TMT對中樞神經損傷及其損傷后恢復的可能機制。
　　方法：①SPF級8～9周齡雄性BALB/c小鼠，分為對照組和五個TMT劑量組(2.00，2.

2、25，2.50，2.75，3.00mg/kg體重)，每組8只。TMT組小鼠給予TMT溶液(i.p.)，對照組給予等體積的生理鹽水處理。通過TMT處理后，小鼠籠內活動表現(xiàn)和Morris水迷宮實驗結果確定TMT急性暴露劑量，在該劑量下小鼠活動無明顯異常，但卻能夠引起小鼠學習記憶功能損傷。②將小鼠分為對照組(168h)和TMT組(168h)，研究TMT急性暴露對BALB/c小鼠學習記憶功能損傷后的恢復情況。③通過western blot實驗檢

3、測BALB/c小鼠TMT急性暴露后24h和168h其海馬和額皮質中Svn及GAP-43表達變化情況。④采用組織病理切片技術，觀察TMT急性暴露對小鼠海馬的損傷作用。
　　結果：
　?、?TMT急性暴露24h后，TMT2.00，2.25mg/kg組BALB/c小鼠籠內活動均未見異常表現(xiàn)；TMT2.50，2.75，3.00mg/kg組小鼠攝食及活動量減少，出現(xiàn)顫抖現(xiàn)象，部分小鼠尾部有咬傷痕跡。Morris水迷宮實驗表明，TMT暴

4、露后24h，從第3次訓練開始，TMT2.25，2.50，2.75mg/kg組小鼠較對照組小鼠逃逸潛伏期顯著延長(p<0.01)。TMT2.00mg/kg組小鼠僅在第4次(p<0.01)，5次(p<0.05)，7次(p<0.01)訓練逃逸潛伏期與對照組有顯著性差異。BALB/c小鼠在TMT3.00mg/kg暴露后24h，喪失游泳能力，無法進行MWM實驗。因此，確定BALB/c小鼠的TMT急性暴露劑量為2.00mg/kg體重。
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5、 TMT暴露前至暴露后168h，小鼠活動量及進食量先減少后增多，體重先下降后上升；Morris水迷宮實驗表明，TMT暴露后168h小鼠經過訓練，逐漸能夠找到隱藏的平臺，其逃逸潛伏期除第4訓練外與對照組均無顯著性差異(p<0.05)。
　?、?TMT2.25 mg/kg暴露后24h，TMT組小鼠海馬和額皮質中Syn表達較對照組顯著降低(p<0.01)。海馬中Syn表達水平減少至對照組的80.24±18.07％(p<0.01)；額皮質

6、中Syn表達水平減少至對照組的73.78±16.97％(p<0.01)。GAP-43表達較對照組則均無顯著性差異。TMT2.25 mg/kg暴露后168h，TMT組小鼠海馬中和額皮質中Syn表達較對照組均升高，但無顯著性差異。海馬中GAP-43表達水平升高至對照組的119.68±15.98％(p<0.01)；額皮質中GAP-43表達水平升高至對照組的129.31±13.38％(p<0.01)。
　?、?BALB/c小鼠在TMT2.

7、25 mg/kg暴露后24h，其海馬未見明顯異常。而當TMT3.00 mg/kg暴露24小時后，其海馬切片中DG區(qū)顆粒細胞出現(xiàn)壞死，但CA1區(qū)和CA3區(qū)椎體細胞均形態(tài)未見明顯異常。在TMT2.25 mg/kg暴露后48h，小鼠海馬DG區(qū)出現(xiàn)大量顆粒細胞染色質固縮，并可見神經元細胞缺失形成的空洞，CA3區(qū)椎體細胞則明顯腫脹，CA1區(qū)椎體細胞形態(tài)未見明顯異。在TMT2.25 mg/kg的觀察時間延至168小時后，小鼠海馬切片DG區(qū)可見部分顆

8、粒細胞染色質固縮及神經元細胞缺失形成的空洞，CA1區(qū)和CA3區(qū)椎體細胞均形態(tài)未見明顯異常。
　　結論：TMT急性暴露劑量為2.25 mg/kg(i.p.)，在暴露后24h時可引起B(yǎng)ALB/c小鼠空間學習記憶功能損傷，并引起處理小鼠海馬和額皮質中Syn表達水平降低；而這種損傷作用在TMT暴露后168h減弱，同時其海馬和額皮質中GAP-43表達上升。提示我們TMT導致的學習記憶功能損傷可能與Syn表達水平降低有關，而GAP-43在TM