嚴重發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(SFTSV)與宿主先天免疫相互作用的初步研究.pdf

1、目的:嚴重發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(Severe fever with thrombocytopeniasyndrome virus，SFTSV)于2009年首次在國內(nèi)報道，它能夠引起發(fā)熱，血小板減少以及胃腸道癥狀。SFTSV經(jīng)蜱蟲叮咬傳播，主要發(fā)生在鄉(xiāng)村地區(qū)，早期致死率高達10％-30％。目前還沒有針對SFTSV的特異性抗病毒藥物，同時，關于SFTSV致病機制的研究報道還較少，并有待進一步探討。
　　材料和方法:首先用含有SF

2、TSV的病人全血感染Vero細胞，利用Vero細胞獲取后續(xù)試驗所需要的病毒，利用SFTSV定量試劑盒測定病毒的載量;讓SFTSV感染Hela,Huh7.0，Huh7.5.1三種細胞，用實時熒光定量聚合酶鏈反應(Realtime PCR)檢測IFNα、IFNβ及下游干擾素刺激基因(interferon stimulated gene，ISG)的表達，觀察SFTSV對宿主固有免疫的影響;利用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot，WB)檢測

3、SFTSV以及非結構蛋白(non-structural protein,NS)對p-STAT1的影響;利用雙熒光報告基因法檢測干擾素刺激反應原件(Interferon stimulated response element，ISRE)的活性，研究SFTSV以及其編碼的NS蛋白對外源性Ⅰ型IFN信號通路的影響，為闡明SFTSV致病機制奠定基礎。
　　結果:SFTSV能夠成功感染Vero，Hela，Huh7.0及Huh7.5.1四種細

4、胞;SFTSV在Hela細胞內(nèi)能夠激活宿主固有免疫，IFNα/β水平呈現(xiàn)升高趨勢，RIG-Ⅰ，TLR-3水平也相應升高，而在Huh7.0，Huh7.5.1細胞內(nèi)IFNα/β水平并沒有升高;SFTSV能夠通過NS蛋白抑制外源性Ⅰ型IFN信號通路:抑制p-STAT1的水平，抑制ISRE的活性;抑制ISGs的表達。
　　結論:研究結果表明SFTSV可能通過TLR-3信號途徑激活宿主固有免疫;SFTSV編碼的NS蛋白可能是SFTSV逃逸宿