抗磷脂抗體促進非小細(xì)胞肺癌浸潤轉(zhuǎn)移及機制的探討.pdf

1、目的：
　　研究抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody，ACA)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ，anti-β2GPⅠ)在非小細(xì)胞肺癌血清中的表達，計數(shù)非小細(xì)胞肺癌組織中微血管的密度，探討血清中抗磷脂抗體與肺癌浸潤轉(zhuǎn)移及血管密度的相關(guān)性，并檢測抗磷脂綜合癥(APS)來源的aPL+(IgG)對肺癌CSF-1、TF、VEGF基因表達的影響，進一步觀察aPL+(IgG)對肺癌細(xì)胞增殖

2、和侵襲的影響，為非小細(xì)胞肺癌浸潤轉(zhuǎn)移的機制提供新的思路。
　　方法：
　　(1)化學(xué)發(fā)光法檢測肺癌患者組和健康對照組血清中抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody，ACA-IgG、IgM)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ，anti-β2GPⅠ-IgG、IgM)的表達，免疫組化方法檢測肺癌組織中微血栓及血管密度。
　　(2)親和層析柱法提取抗磷脂綜合癥患者血清中總IgG

3、，SDS-PAGE方法檢測所提取IgG的純度。
　　(3)流式細(xì)胞術(shù)及免疫熒光法檢測肺癌細(xì)胞A549、H1299、H460磷脂酰絲氨酸的暴露。
　　(4)RT-PCR的方法檢測不同時間段對照組及aPL+(IgG)處理組A549細(xì)胞CSF-1、TF、VEGF的表達。
　　(5)CCK-8檢測aPL+(IgG)對A549細(xì)胞增殖能力的影響，細(xì)胞克隆實驗進一步驗證aPL+(IgG)對細(xì)胞增殖能力的影響。
　　(6)Tr

4、answell實驗檢測aPL+(IgG)對A549細(xì)胞侵襲能力的影響。
　　結(jié)果：
　　(1)與對照組相比，非小細(xì)胞肺癌組抗磷脂抗體-抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody，ACA-IgG、IgM)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ，anti-β2GPⅠ-IgG)表達較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。與淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移肺癌組相比，抗心磷脂抗體(anticardiolipi

5、n antibody，ACA-IgG)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ，anti-β2GPⅠ-IgG)在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移肺癌組明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);與原位癌組相比，抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody，ACA-IgG、IgM)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ，anti-β2GPⅠ-IgG、IgM)濃度在浸潤性癌組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意

6、義(p＜0.01)。
　　(2)非小細(xì)胞肺癌組織內(nèi)微血管密度在肺癌Ⅲ期患者明顯高于Ⅰ、Ⅱ期患者，在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移肺癌組高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移肺癌組(p＜0.05）。
　　(3)抗磷脂抗體-抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody，ACA-IgG)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ，anti-β2GPⅠ-IgG)與肺癌細(xì)胞肺癌組織內(nèi)微血管密度存在顯著的相關(guān)性(p＜0.0001R=0.28

7、55p=0.0001R=0.2264)。
　　(4)肺癌細(xì)胞A549、H1299、H460表面存在磷脂酰絲氨酸的暴露。
　　(5)與對照組相比，aPL+(IgG)處理組CSF-1、TF、VEGF表達上調(diào)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.01)。
　　(6)aPL+(IgG)處理組，細(xì)胞增殖及侵襲能力增強，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　(1)抗磷脂抗體在非小細(xì)胞肺癌患者升高，可能與腫瘤的進

8、展密切相關(guān)。
　　(2)抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody，ACA)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ，anti-β2GPⅠ)與非小細(xì)胞肺癌的浸潤轉(zhuǎn)移及血管密度有顯著相關(guān)性，可能通過促進血管的生成促進肺癌的發(fā)展。
　　(3)APS患者純化的aPL+(IgG)能夠促進A549細(xì)胞CSF-1、TF、VEGF的表達，可能通過上調(diào)CSF-1、TF、VEGF的表達促進肺癌的血管生