抗磷脂抗體促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移及機(jī)制的探討.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  研究抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody,ACA)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ,anti-β2GPⅠ)在非小細(xì)胞肺癌血清中的表達(dá),計(jì)數(shù)非小細(xì)胞肺癌組織中微血管的密度,探討血清中抗磷脂抗體與肺癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移及血管密度的相關(guān)性,并檢測(cè)抗磷脂綜合癥(APS)來(lái)源的aPL+(IgG)對(duì)肺癌CSF-1、TF、VEGF基因表達(dá)的影響,進(jìn)一步觀察aPL+(IgG)對(duì)肺癌細(xì)胞增殖

2、和侵襲的影響,為非小細(xì)胞肺癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的機(jī)制提供新的思路。
  方法:
  (1)化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)肺癌患者組和健康對(duì)照組血清中抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody,ACA-IgG、IgM)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ,anti-β2GPⅠ-IgG、IgM)的表達(dá),免疫組化方法檢測(cè)肺癌組織中微血栓及血管密度。
  (2)親和層析柱法提取抗磷脂綜合癥患者血清中總IgG

3、,SDS-PAGE方法檢測(cè)所提取IgG的純度。
  (3)流式細(xì)胞術(shù)及免疫熒光法檢測(cè)肺癌細(xì)胞A549、H1299、H460磷脂酰絲氨酸的暴露。
  (4)RT-PCR的方法檢測(cè)不同時(shí)間段對(duì)照組及aPL+(IgG)處理組A549細(xì)胞CSF-1、TF、VEGF的表達(dá)。
  (5)CCK-8檢測(cè)aPL+(IgG)對(duì)A549細(xì)胞增殖能力的影響,細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證aPL+(IgG)對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響。
  (6)Tr

4、answell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)aPL+(IgG)對(duì)A549細(xì)胞侵襲能力的影響。
  結(jié)果:
  (1)與對(duì)照組相比,非小細(xì)胞肺癌組抗磷脂抗體-抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody,ACA-IgG、IgM)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ,anti-β2GPⅠ-IgG)表達(dá)較高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。與淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移肺癌組相比,抗心磷脂抗體(anticardiolipi

5、n antibody,ACA-IgG)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ,anti-β2GPⅠ-IgG)在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移肺癌組明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);與原位癌組相比,抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody,ACA-IgG、IgM)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ,anti-β2GPⅠ-IgG、IgM)濃度在浸潤(rùn)性癌組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

6、義(p<0.01)。
  (2)非小細(xì)胞肺癌組織內(nèi)微血管密度在肺癌Ⅲ期患者明顯高于Ⅰ、Ⅱ期患者,在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移肺癌組高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移肺癌組(p<0.05)。
  (3)抗磷脂抗體-抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody,ACA-IgG)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ,anti-β2GPⅠ-IgG)與肺癌細(xì)胞肺癌組織內(nèi)微血管密度存在顯著的相關(guān)性(p<0.0001R=0.28

7、55p=0.0001R=0.2264)。
  (4)肺癌細(xì)胞A549、H1299、H460表面存在磷脂酰絲氨酸的暴露。
  (5)與對(duì)照組相比,aPL+(IgG)處理組CSF-1、TF、VEGF表達(dá)上調(diào),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。
  (6)aPL+(IgG)處理組,細(xì)胞增殖及侵襲能力增強(qiáng),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
  結(jié)論:
  (1)抗磷脂抗體在非小細(xì)胞肺癌患者升高,可能與腫瘤的進(jìn)

8、展密切相關(guān)。
  (2)抗心磷脂抗體(anticardiolipin antibody,ACA)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗體(anti-β2glycoproteinⅠ,anti-β2GPⅠ)與非小細(xì)胞肺癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移及血管密度有顯著相關(guān)性,可能通過(guò)促進(jìn)血管的生成促進(jìn)肺癌的發(fā)展。
  (3)APS患者純化的aPL+(IgG)能夠促進(jìn)A549細(xì)胞CSF-1、TF、VEGF的表達(dá),可能通過(guò)上調(diào)CSF-1、TF、VEGF的表達(dá)促進(jìn)肺癌的血管生

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