Irisin對胰島β細胞增殖和凋亡的影響及機制研究.pdf

1、目的：
　　胰島β細胞數(shù)量的減少和功能障礙在2型糖尿病發(fā)病過程中起著關鍵作用。高糖毒性可導致胰島β細胞的凋亡增加和功能障礙。Irisin是新近發(fā)現(xiàn)的一種肌肉因子，可使白色脂肪組織棕色化，增加脂肪組織生熱作用以及能量消耗，具有減重、改善胰島素抵抗及降低血糖的功能。最近的研究發(fā)現(xiàn)irisin具有促進細胞增殖以及保護細胞的功能。然而關于irisin對胰島β細胞的作用尚不清楚。因此本研究探討irisin對體外培養(yǎng)的 INS-1胰島β細胞增

2、殖的影響和高糖環(huán)境下β細胞凋亡的影響及其相關機制。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)胰島β細胞INS-1細胞株，用不同濃度（0、40、60、80、100、150 ng/ml）的irisin干預INS-1細胞12 h；用100 ng/ml irisin干預INS-1細胞不同時間（0、6、12、18、24、48 h），采用CCK-8檢測細胞增殖情況。100 ng/ml irisin干預INS-1細胞24 h，或者先用10μmol/l E

3、RK抑制劑U0126或P38 MAPK抑制劑SB203580孵育INS-1細胞30 min再接著用100 ng/ml irisin干預細胞24 h后，通過western blot檢測ERK和P38蛋白磷酸化水平，CCK-8檢測細胞增殖情況。用25 mmol/l的葡萄糖培養(yǎng)INS-1細胞24 h，接著用100 ng/ml irisin干預24 h后，通過Annexin V-FITC/PI染色，流式細胞儀檢測細胞凋亡情況；采用 ELISA檢

4、測INS-1細胞對葡萄糖刺激的胰島素分泌情況；采用western blot方法檢測INS-1細胞內促凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9、Bad、Bax的水平及抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl的水平。
　　結果：
　　Irisin干預后的INS-1細胞活力顯著增加，且100 ng/ml irisin干預24 h時作用最明顯（P<0.05）。與對照組相比，irisin干預后的INS-1細胞內ERK和P38蛋白磷酸化

5、水平明顯增加，ERK抑制劑U0126或P38 MAPK抑制劑SB203580可以降低irisin對 ERK和P38蛋白磷酸化的水平，并且可以抑制 irisin對 INS-1細胞的增殖作用（P<0.05）。Irisin干預高糖處理后的INS-1細胞后，細胞凋亡率顯著下降（P<0.05），并且葡萄糖刺激的胰島素分泌能力增強（P<0.05）。與單用高糖干預相比，irisin干預后細胞內Bcl-2和Bcl-xl抗凋亡蛋白水平升高，Caspase