我國西北地區(qū)羊布魯氏菌分子流行病學(xué)及抗原表位多肽的篩選.pdf

1、布魯氏菌病(Brucellosis)是由兼性細胞內(nèi)寄生的布魯氏菌(Brucella)引起的人獸共患烈性傳染病，近年來在我國大部分地區(qū)再次流行，引起了嚴重的經(jīng)濟損失和公共衛(wèi)生問題。本論文旨在分析我國西北地區(qū)羊布魯氏菌分子流行病學(xué)，了解布魯氏菌優(yōu)勢菌株及其菌株基因特征，追溯流行菌株的來源和變異情況;根據(jù)流行菌株基因組特征，選擇保守的免疫抗原蛋白，篩選有針對性的抗原表位多肽。
　　從我國西北新疆、青海、甘肅和內(nèi)蒙古四省區(qū)一些地區(qū)采集羊和

2、牦牛疑似感染布魯氏菌病流產(chǎn)胎兒的脾臟樣本480份，共分離鑒定布魯氏菌菌株66株，其中馬耳他布魯氏菌3型58株，馬耳他布魯氏菌1型1株，流產(chǎn)布魯氏菌1型2株，流產(chǎn)布魯氏菌3型3株和豬布魯氏菌3型2株;用MLVA和MLST基因分析技術(shù)，對66株布魯氏菌菌株進行分子流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，66株布魯氏菌分離株中包含46個MLVA16基因型，37株菌株擁有獨立特有的基因型，有一株為新的基因型（基因型369），其中基因型116(n=49)和ST8(n=

3、53)為優(yōu)勢的基因型。MLVA16分析66株分離株的亨特-加斯頓多樣化指數(shù)(HGDI)表明，菌株間多樣化水平為0979，以MLVA11進行分子流行病學(xué)分析表明，我國馬耳他布魯氏菌流行菌株的主要基因型為116，分離株MLVA16的鑒定分析有助于深入了解西北地區(qū)動物布魯氏菌病流行情況。
　　首次對甘肅馬耳他布魯氏菌流行株分析發(fā)現(xiàn)，其流行菌株的種類、基因型無規(guī)律性。分子流行病學(xué)比較表明，人感染布魯氏菌病主要來源于羊。甘肅慶陽地區(qū)2011

4、-2015年間布魯氏菌血清流行情況分析表明，布魯氏菌年流行率在004％-475％之間，8個縣區(qū)年均流行率在0％-996％之間，布魯氏菌發(fā)病呈現(xiàn)上升趨勢，差異明顯;分離菌株分子流行病學(xué)結(jié)果表明，甘肅慶陽地區(qū)羊布魯氏菌不僅有本地區(qū)周圍的優(yōu)勢流行菌株，而且也存在外來菌株的混合感染。
　　對分離于甘肅和青海的2株（羊源和牦牛源各1株）馬耳他布魯氏菌代表株全基因組測序分析，結(jié)果顯示全基因組相對保守，長度為33Mb，有兩個環(huán)狀染色體，但基因組

5、上也存在數(shù)量不等的特異基因。應(yīng)用樹突狀細胞篩選布魯氏菌種間保守的Omp16和L7/L12免疫蛋白潛在的抗原表位多肽，小鼠免疫評價結(jié)果表明omp16-1和L7/L12-4為T細胞抗原表位多肽，能刺激細胞和免疫動物發(fā)揮細胞免疫功能;omp16-5能夠與布魯氏菌陽性血清發(fā)生強烈反應(yīng)，也能發(fā)揮體液免疫功能。
　　總之，我國西北地區(qū)羊主要流行馬耳他布魯氏菌3型菌株，優(yōu)勢基因型為116(MLVA11)和ST8(MLST)，布魯氏菌菌株主要來自