SU2237的小腸吸收研究.pdf

1、目的:按新藥申請資料技術要求對專利藥物SU2237進行大鼠在體腸吸收的研究;優(yōu)化蛋黃卵磷脂的提取工藝,提取的卵磷脂用作人工膜模擬滲透的成膜材料;進行SU2237蛋黃卵磷脂人工模擬滲透膜(AMPA)的表觀滲透率研究并評價該人工模擬滲透膜能否適用預測藥物在胃腸道內的滲透率。
　　方法:使用單向灌流法進行SU2237大鼠在體小腸灌流實驗,首先進行紫外分光光度計測定的方法學考察,方法的特異性考察顯示空白腸液在SU2237最大吸收波長(28

2、7nm)處無吸收;SU2237的標準曲線回歸方程為Y=0.0652*X-0.004,R2=0.9999;回收率考察結果低(1.0ug/mL)、中(4.0ug/mL)、高(8.0ug/mL)三個濃度的相對回收率分別為118％,114%,102%,符合方法學要求;對低(0.1ug/mL)、中(2.0ug/mL)、高(8.0ug/mL)三個濃度分別進行日內精密度和日間精密度考察,結果日內精密度的相對標準偏差RSD為0.1%,0.6%,1.7%

3、,日間精密度的相對標準偏差RSD為0.1%,1.0%,2.0%,符合方法學要求;低(0.1ug/mL)、中(2.0ug/mL)、高(8.0ug/mL)三個濃度樣品的凍融穩(wěn)定性的相對誤差RE%分別是14%,-11.2%,-7.9%,冷凍穩(wěn)定性分別為14%,-3.5%,1.9%,常溫下4小時的穩(wěn)定性RSD為1.05%,均符合方法學要求。分別考察了小腸不同部位,不同pH值以及不同藥物濃度對吸收的影響。采用有機溶劑提取法提取蛋黃卵磷脂,并且對提

4、取時間,提取溫度以及提取溶劑的濃度進行了單因素考察和多因素正交優(yōu)化。根據(jù)平行人工滲透膜試驗(PAMPA)的實驗原理,使用實驗室提取的蛋黃卵磷脂作為成膜材料,建立人工滲透膜并研究藥物SU2237的滲透。
　　結果:SU2237在大鼠在體小腸灌流實驗表明:不同腸段進行單向灌流實驗,在灌腸液為pH7.4,濃度為200ug/ml時,SU2237在十二指腸的滲透率系數(shù)為(18.41±1.32)*10-5cm·s-1,為小腸內滲透最大的部位;

5、空腸次之,滲透系數(shù)為(7.48±0.64)*10-5cm·s-1,即使在滲透率最低的回腸,其滲透率系數(shù)可達(7.47±0.82)*10-5cm·s-1。在200ug/ml濃度條件下,采用不同pH的灌腸液進行整腸段單向灌流實驗時,使用pH7.4的灌腸液與pH6.8、pH5.4的灌腸液所測得表觀滲透率之間存在顯著性差異(P<0.05),其滲透率依次為(12.32±1.16)*10-5cm·s-1,(7.86±1.29)*10-5cm·s-1

6、,(6.99±1.28)*10-5cm·s-1。在pH7.4的條件下,高(800ug/ml)、中(200ug/ml)、低(50ug/ml)濃度的SU2237腸灌流液在小腸整腸段單向灌流實驗所得滲透率,分別為(6.64±1.85)*10-5cm·s-1,(12.32±1.16)*10-5cm·s-1,(13.26±2.47)*10-5cm·s-1。
　　為探討建立人工膜滲透實驗替代動物實驗,本研究建立了蛋黃卵磷脂人工膜模型。

7、　　蛋黃卵磷脂提取優(yōu)化的實驗條件如下:提取攪拌時間為40min,提取的溫度為25℃,提取的溶劑與溶質的質量體積比為6ml/g,提取收率能達到8%左右;通過消化定磷法可以測出卵磷脂平均含磷量為11.65%。
　　人工膜滲透實驗結果:布洛芬在我們的人工膜模型測得的表觀滲透率為(6.7348±1.3514)*10-6cm/s。SU2237在人工膜模型測得的表觀滲透率為(5.0168±0.3905)*10-6cm/s。
　　結論:大

8、鼠在體小腸灌流實驗說明SU2237在小腸的各個部位的吸收良好,尤其是在十二指腸吸收最大,其滲透率分別為(18.41±1.32)*10-5cm·s-1,(7.48±0.64)*10-5cm·s-1,(7.47±0.82)*10-5cm·s-1;SU2237在pH7.4的情況下表觀滲透率(12.32±1.16)*10-5cm·s-1優(yōu)于pH6.8的滲透率(7.86±1.29)*10-5cm·s-1和pH5.4的滲透率(6.99±1.28)*

9、10-5cm·s-1;使用濃度為50ug/ml的灌腸液所測得表觀滲透率最大,為(6.99±1.28)*10-5cm·s-1,灌腸液濃度為200ug/ml所得滲透率為(12.32±1.16)*10-5cm·s-1,使用高濃度(800ug/ml)灌腸液所測得表觀滲透率(6.64±1.85)*10-5cm·s-1最小。小腸對SU2237的吸收明顯受到藥物濃度的影響,推測SU2237在小腸不僅存在被動吸收,也存在受到主動吸收機制的影響。以上實驗

10、所得滲透率均大于>10-6cm/s,說明SU2237是高滲透的藥物,為該藥的進一步研究奠定基礎,為設計口服制劑提供了科學依據(jù)。
　　經(jīng)過上述提取優(yōu)化條件,提取攪拌時間為40min,提取的溫度為25℃,提取的溶劑與溶質的質量體積比為6ml/g,得到提取率相對較高的蛋黃卵磷脂的提取方法。
　　人工膜滲透實驗布洛芬的表觀滲透率為(6.7348±1.3514)*10-6cm/s,而用PAMPA所得的文獻值為(2.40±0.38)*1