SU2237的小腸吸收研究.pdf

1、目的:按新藥申請(qǐng)資料技術(shù)要求對(duì)專利藥物SU2237進(jìn)行大鼠在體腸吸收的研究;優(yōu)化蛋黃卵磷脂的提取工藝,提取的卵磷脂用作人工膜模擬滲透的成膜材料;進(jìn)行SU2237蛋黃卵磷脂人工模擬滲透膜(AMPA)的表觀滲透率研究并評(píng)價(jià)該人工模擬滲透膜能否適用預(yù)測(cè)藥物在胃腸道內(nèi)的滲透率。
　　方法:使用單向灌流法進(jìn)行SU2237大鼠在體小腸灌流實(shí)驗(yàn),首先進(jìn)行紫外分光光度計(jì)測(cè)定的方法學(xué)考察,方法的特異性考察顯示空白腸液在SU2237最大吸收波長(zhǎng)(28

2、7nm)處無(wú)吸收;SU2237的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為Y=0.0652*X-0.004,R2=0.9999;回收率考察結(jié)果低(1.0ug/mL)、中(4.0ug/mL)、高(8.0ug/mL)三個(gè)濃度的相對(duì)回收率分別為118％,114%,102%,符合方法學(xué)要求;對(duì)低(0.1ug/mL)、中(2.0ug/mL)、高(8.0ug/mL)三個(gè)濃度分別進(jìn)行日內(nèi)精密度和日間精密度考察,結(jié)果日內(nèi)精密度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為0.1%,0.6%,1.7%

3、,日間精密度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為0.1%,1.0%,2.0%,符合方法學(xué)要求;低(0.1ug/mL)、中(2.0ug/mL)、高(8.0ug/mL)三個(gè)濃度樣品的凍融穩(wěn)定性的相對(duì)誤差RE%分別是14%,-11.2%,-7.9%,冷凍穩(wěn)定性分別為14%,-3.5%,1.9%,常溫下4小時(shí)的穩(wěn)定性RSD為1.05%,均符合方法學(xué)要求。分別考察了小腸不同部位,不同pH值以及不同藥物濃度對(duì)吸收的影響。采用有機(jī)溶劑提取法提取蛋黃卵磷脂,并且對(duì)提

4、取時(shí)間,提取溫度以及提取溶劑的濃度進(jìn)行了單因素考察和多因素正交優(yōu)化。根據(jù)平行人工滲透膜試驗(yàn)(PAMPA)的實(shí)驗(yàn)原理,使用實(shí)驗(yàn)室提取的蛋黃卵磷脂作為成膜材料,建立人工滲透膜并研究藥物SU2237的滲透。
　　結(jié)果:SU2237在大鼠在體小腸灌流實(shí)驗(yàn)表明:不同腸段進(jìn)行單向灌流實(shí)驗(yàn),在灌腸液為pH7.4,濃度為200ug/ml時(shí),SU2237在十二指腸的滲透率系數(shù)為(18.41±1.32)*10-5cm·s-1,為小腸內(nèi)滲透最大的部位;

5、空腸次之,滲透系數(shù)為(7.48±0.64)*10-5cm·s-1,即使在滲透率最低的回腸,其滲透率系數(shù)可達(dá)(7.47±0.82)*10-5cm·s-1。在200ug/ml濃度條件下,采用不同pH的灌腸液進(jìn)行整腸段單向灌流實(shí)驗(yàn)時(shí),使用pH7.4的灌腸液與pH6.8、pH5.4的灌腸液所測(cè)得表觀滲透率之間存在顯著性差異(P<0.05),其滲透率依次為(12.32±1.16)*10-5cm·s-1,(7.86±1.29)*10-5cm·s-1

6、,(6.99±1.28)*10-5cm·s-1。在pH7.4的條件下,高(800ug/ml)、中(200ug/ml)、低(50ug/ml)濃度的SU2237腸灌流液在小腸整腸段單向灌流實(shí)驗(yàn)所得滲透率,分別為(6.64±1.85)*10-5cm·s-1,(12.32±1.16)*10-5cm·s-1,(13.26±2.47)*10-5cm·s-1。
　　為探討建立人工膜滲透實(shí)驗(yàn)替代動(dòng)物實(shí)驗(yàn),本研究建立了蛋黃卵磷脂人工膜模型。

7、　　蛋黃卵磷脂提取優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件如下:提取攪拌時(shí)間為40min,提取的溫度為25℃,提取的溶劑與溶質(zhì)的質(zhì)量體積比為6ml/g,提取收率能達(dá)到8%左右;通過(guò)消化定磷法可以測(cè)出卵磷脂平均含磷量為11.65%。
　　人工膜滲透實(shí)驗(yàn)結(jié)果:布洛芬在我們的人工膜模型測(cè)得的表觀滲透率為(6.7348±1.3514)*10-6cm/s。SU2237在人工膜模型測(cè)得的表觀滲透率為(5.0168±0.3905)*10-6cm/s。
　　結(jié)論:大

8、鼠在體小腸灌流實(shí)驗(yàn)說(shuō)明SU2237在小腸的各個(gè)部位的吸收良好,尤其是在十二指腸吸收最大,其滲透率分別為(18.41±1.32)*10-5cm·s-1,(7.48±0.64)*10-5cm·s-1,(7.47±0.82)*10-5cm·s-1;SU2237在pH7.4的情況下表觀滲透率(12.32±1.16)*10-5cm·s-1優(yōu)于pH6.8的滲透率(7.86±1.29)*10-5cm·s-1和pH5.4的滲透率(6.99±1.28)*

9、10-5cm·s-1;使用濃度為50ug/ml的灌腸液所測(cè)得表觀滲透率最大,為(6.99±1.28)*10-5cm·s-1,灌腸液濃度為200ug/ml所得滲透率為(12.32±1.16)*10-5cm·s-1,使用高濃度(800ug/ml)灌腸液所測(cè)得表觀滲透率(6.64±1.85)*10-5cm·s-1最小。小腸對(duì)SU2237的吸收明顯受到藥物濃度的影響,推測(cè)SU2237在小腸不僅存在被動(dòng)吸收,也存在受到主動(dòng)吸收機(jī)制的影響。以上實(shí)驗(yàn)

10、所得滲透率均大于>10-6cm/s,說(shuō)明SU2237是高滲透的藥物,為該藥的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ),為設(shè)計(jì)口服制劑提供了科學(xué)依據(jù)。
　　經(jīng)過(guò)上述提取優(yōu)化條件,提取攪拌時(shí)間為40min,提取的溫度為25℃,提取的溶劑與溶質(zhì)的質(zhì)量體積比為6ml/g,得到提取率相對(duì)較高的蛋黃卵磷脂的提取方法。
　　人工膜滲透實(shí)驗(yàn)布洛芬的表觀滲透率為(6.7348±1.3514)*10-6cm/s,而用PAMPA所得的文獻(xiàn)值為(2.40±0.38)*1