不同形態(tài)鐵在肉仔雞小腸中的吸收特點及其機制研究.pdf

1、本論文研究共設(shè)2個試驗，采用體內(nèi)原位結(jié)扎灌注腸段法和自然飼喂法，研究不同絡(luò)（螯）合強度有機鐵和無機硫酸亞鐵在肉仔雞小腸中的吸收特點及其機制。
　　試驗一采用原位結(jié)扎灌注腸段法研究不同形態(tài)鐵在肉仔雞小腸中的吸收特點。本試驗又分為兩個小試驗：試驗1和試驗2。試驗1采用單因子完全隨機設(shè)計，共設(shè)8個處理組，分別為不加鐵的空白對照組以及分別添加無機硫酸亞鐵、甘氨酸鐵、硫酸亞鐵與甘氨酸混合物、硫酸亞鐵與蛋氨酸混合物、弱絡(luò)合強度（Qf=1.37

2、）蛋氨酸鐵（Fe-Met W）、中等絡(luò)合強度（Qf=43.6）蛋白鐵（Fe-Pro M）和極強螯合強度（Qf=8.59×103）蛋白鐵（Fe-Pro ES）的處理組，添加鐵組的鐵灌注濃度為0.45 mmol/L，灌注時間30min。試驗2采用4×6+1雙因子完全隨機設(shè)計，共設(shè)25個處理組，4種鐵源分別為無機硫酸亞鐵、Fe-Met W、Fe-Pro M和Fe-Pro ES，6個鐵添加水平分別為6.25μg/ml(0.11mM）、12.5μ

3、g/ml(0.22 mM)、25μg/ml(0.45 mM)、50μg/ml(0.9 mM)、100μg/ml(1.79 mM)和200μg/ml(3.58 mM)，同時設(shè)置不加鐵的空白對照組，灌注時間30min。試驗1結(jié)果表明：在十二指腸中無論是有機鐵還是無機鐵的鐵吸收均顯著高于空腸和回腸中的鐵吸收，是后者的1.35-2.8倍；不同處理組肉仔雞在小腸各段的鐵吸收均無顯著差異。試驗2結(jié)果表明：（1）灌注濃度為3.58mM時，中等絡(luò)合強度

4、鐵（Fe-Pro M）和極強螯合強度鐵（Fe-Pro ES）在肉仔雞十二指腸中的吸收速率顯著高于弱絡(luò)合強度鐵（Fe-Pro W）和無機硫酸亞鐵；（2）對不同形態(tài)鐵吸收速率隨其鐵添加水平的變化趨勢進(jìn)行擬合，發(fā)現(xiàn)不同鐵源在肉仔雞十二指腸中的吸收動力學(xué)模型均為飽和載體吸收；（3）對吸收動力學(xué)模型的參數(shù)進(jìn)行比較，中等絡(luò)合強度有機鐵（Fe-Pro M）和極強螯合強度有機鐵（Fe-Pro ES）的Jmax和Km均顯著高于弱絡(luò)合強度有機鐵（Fe-Pr

5、o W）和無機硫酸亞鐵。結(jié)果表明，肉仔雞小腸吸收鐵的主要腸段是十二指腸，不同鐵源在肉仔雞十二指腸中的吸收動力學(xué)模型均以飽和載體吸收為主；在小腸灌注鐵濃度較高時，中等和極強絡(luò)（螯）合強度有機鐵的鐵吸收顯著高于弱絡(luò)合強度有機鐵和無機硫酸亞鐵；將蛋氨酸或甘氨酸與硫酸亞鐵簡單混合不能改善小腸鐵的吸收。
　　試驗二采用自然飼喂法研究了不同形態(tài)鐵對肉仔雞肝門靜脈血漿鐵含量及其小腸中鐵轉(zhuǎn)運載體DMT1和FPN1基因表達(dá)的影響，探討不同形態(tài)鐵的吸

6、收差異及其機制。600只1日齡商品代Arbor Acres（AA）肉公雛于1-7日齡統(tǒng)一飼喂鐵缺乏的葡萄糖-酪蛋白純合飼糧（實測鐵含量為3.26mg/kg），使肉仔雞處于臨界缺鐵狀態(tài)。于8日齡時，按平均體重從中選取480只雞，隨機分成5個處理組，每個處理組8個重復(fù)，每個重復(fù)12只雞，分別飼喂對照組（不添加鐵水平，實測鐵含量為69.86 mg/kg）和添加60 mg/kg鐵分別源于無機硫酸亞鐵、Fe-Met W、Fe-Pro M和Fe-P

7、ro ES的飼糧，試驗期14天。試驗結(jié)果表明：(1)在試驗的第7天(14日齡)，肝門靜脈血漿鐵含量各處理組之間沒有顯著差異。在試驗的第14天（21日齡），添加鐵組的肝門靜脈血漿鐵含量顯著高于對照組，且中等絡(luò)合強度有機鐵組的肝門靜脈血漿鐵含量和極強螯合強度有機鐵組差異不顯著，但是均顯著高于弱絡(luò)合強度有機鐵組和無機硫酸亞鐵組。（2）十二指腸中二價金屬轉(zhuǎn)運蛋白1（DMT1）和膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白1（FPN1）的 mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著高于空腸和

8、回腸；與不添加鐵的對照組相比，飼糧添加鐵均顯著降低肉仔雞十二指腸的DMT1和FPN1 mRNA表達(dá)水平，而添加不同鐵源組之間的小腸各段的DMT1和FPN1 mRNA和蛋白表達(dá)水平差異不顯著。以上結(jié)果表明：十二指腸是肉仔雞小腸DMT1和FPN1基因表達(dá)的主要部位，可能是試驗一獲得的十二指腸是肉雞小腸鐵吸收主要部位及其鐵吸收主要是載體轉(zhuǎn)運方式的重要原因；肉雞小腸對中等絡(luò)合強度有機鐵和極強螯合強度有機鐵的吸收顯著高于弱絡(luò)合強度有機鐵和無機硫酸

9、亞鐵，鐵轉(zhuǎn)運載體DMT1和FPN1可能參與調(diào)節(jié)鐵的吸收。
　　綜上所述，肉仔雞小腸鐵吸收的主要部位是十二指腸；不同鐵源在肉仔雞十二指腸中的吸收方式主要為飽和載體吸收方式；十二指腸是肉仔雞小腸DMT1和FPN1基因表達(dá)的主要部位，可能是十二指腸是肉雞小腸鐵吸收主要部位及其鐵吸收主要是載體轉(zhuǎn)運方式的重要原因；中等絡(luò)合強度有機鐵和極強螯合強度有機鐵在肉雞小腸中的吸收顯著高于弱絡(luò)合強度有機鐵和無機硫酸亞鐵，鐵轉(zhuǎn)運載體DMT1和FPN1可能