EIciRNA和ASAT siRNA功能機(jī)理研究.pdf

1、本文分為兩個(gè)部分進(jìn)行探討：
　　第一部分:RNAi干擾途徑在各種生命活動(dòng)中起著重要的調(diào)控作用。然而，在哺乳動(dòng)物的有絲分裂過程中，RNAi干擾途徑是否參與染色體分離的問題至今還沒有定論。在本文中，我們發(fā)現(xiàn)兩個(gè)RNAi干擾途徑的關(guān)鍵因子（Dicer和AGO2）直接參與調(diào)控染色體分離步驟。降低Dicer和AGO2的表達(dá)水平會(huì)導(dǎo)致高比率的染色體分離滯后現(xiàn)象，而且這個(gè)效應(yīng)不依賴于miRNA通路。另外，我們還發(fā)現(xiàn)α-satellite RNA

2、是人類中期染色體上的重要組成成分。過量積累在染色體上的α-satellite RNA會(huì)干擾著絲粒和動(dòng)粒的形成與功能。進(jìn)一步的研究結(jié)果表明，Dicer和AGO2通過調(diào)控α-satellite RNA在中期染色體上的水平和分布，從而保證CENPC1正確定位到著絲粒區(qū)域，最終確保有絲分裂時(shí)期的染色體可以正確分離。我們的研究成果闡明了哺乳動(dòng)物中RNAi干擾通路在染色體分離中的功能以及功能機(jī)理，為RNAi干擾途徑的功能研究提供了嶄新的視角，為將來

3、相關(guān)的科研目標(biāo)提供了新的方向。
　　第二部分:非編碼RNA是生命活動(dòng)中的關(guān)鍵調(diào)控因子。近幾年，科學(xué)家在人類和鼠類細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了一類具有封閉環(huán)狀結(jié)構(gòu)的環(huán)狀RNA，其中兩個(gè)環(huán)狀RNA定位于細(xì)胞質(zhì)中，扮演著miRNA海綿的角色，調(diào)控細(xì)胞質(zhì)中miRNA的水平含量。在本文中，我們發(fā)現(xiàn)了一類與RNA聚合酶Ⅱ相結(jié)合的環(huán)狀RNA(Exon-intron circular RNA，EIciRNA)。EIciRNA包含內(nèi)含子序列，而且它們的側(cè)翼互補(bǔ)序列