RAF-1活化在MAPK和PI3K信號轉導通路調控胰腺癌細胞侵襲轉移的分子機制.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文中國醫(yī)科大學碩士學位論文R A F ．1 活化在M A P K 和P 1 3 K 信號轉導通路調控胰腺癌細胞侵襲轉移的分子機制T h e m o l e c u l a r m e c h a n i s m o f r e g u l a t i n g p a n c r e a t i cc a n c e r c e l l si n v a s i o na n d m e t a s t a s i

2、so f A c t i v a t e d R A F 一1i nM A P K a n d P 1 3 Ks i g n a l i n g p a t h w a y論文作者 ±監(jiān)堡 指導教師 堡壁壘塾撞申請學位 匡鱟亟± 培養(yǎng)單位 箜三墮盎芏墮一級學科 墮盎匿芏 二級學科 皇E 型芏論文起止時間 2 Q ! 壘生2 旦二至Q 】Z 生至旦中國醫(yī)科大學( 遼寧)2 0 1 7 年2 月中國醫(yī)科大學碩士學位論文摘

3、要目的：胰腺癌是一種致死率極高的惡性腫瘤，預后極差，疾病進展迅速，缺乏臨床癥狀特異性，總體5 年生存率不足5 ％。其原因在于胰腺癌細胞不僅增殖迅速，更重要的是有極強的侵襲及轉移能力。手術仍然是胰腺癌的主要治療方法，然而近8 0 ％左右的病人在明確診斷后已經有遠處轉移或者不可切除的局部轉移而失去了手術適應癥。其預后差的原因在于術后局部復發(fā)和遠處轉移。因此，對胰腺癌細胞侵襲轉移機制的研究成為重中之重。然而至今其侵襲轉移機制仍未完全闡明。在惡

4、性腫瘤中，蛋白質翻譯后修飾的生化過程對細胞功能調控起到重要作用，至今其作用機制未完全明確。蛋白質磷酸化為其翻譯后修飾的一種方式。因此明確腫瘤細胞磷酸化對其生物學功能調控的作用具有重要意義。在我們的先前研究中，針對同源性胰腺癌細胞( 高侵襲轉移性質的P C ．1 ．0 和低侵襲轉移性質的P C 。1 ) ，我們利用磷酸化蛋白芯片技術篩選這兩種細胞中表達具有差異的蛋白及磷酸化位點，并對其中4 5 2 個蛋白的5 8 2 個磷酸化位點進行比對

5、，其中R A F ．1 在T y r - 3 4 1位點上P C 一1 ．0 和P C 一1 細胞中磷酸化水平之比為2 ．6 8 。這一結果表明R A F 一1 可能有調控胰腺癌的侵襲轉移的作用。R A F 一1 ，又稱C —R A F ，是一種原癌基因，據(jù)文獻報道，R A F ．1 在乳腺癌、結直腸腫瘤、非小細胞肺癌等腫瘤中表達量上調。R A F ．1 蛋白為一種絲氨酸／蘇氨酸激酶，連接上游R A S 蛋白及下游M E K l ／2

6、，調控M A P K 級聯(lián)反應。它決定細胞多種過程包括增殖、分化、凋亡、存活以及致癌性轉化。通過一系列的磷酸化，R A F ．1的活化導致M E K 一1 和M E K ．2 ( M A P 2 K 1 ／M E K l 和M A P 2 K 2 ／M E K 2 ) 激活，進而激活E R K l ／2 ，最終激活M A P K 信號轉導通路。而另一種蛋白A K T ，同樣由通過磷酸化蛋白芯片技術篩選出來，在S e r l 2 4 位點

7、上個P C ．1 ．O 和P C ．1 細胞中磷酸化水平之比為O ．3 7 ．A K T 為另一條信號轉導通路P 1 3 K —P T E N ．A K T 的一員，調控與R A F 一1 相似的生物學過程。P 1 3 K ／P T E N ／A k t 和M A P K 信號轉導通路是現(xiàn)今公認的胰腺癌中的活化通路。這些通路具有調控細胞增殖，衰老和凋亡的作用。并使細胞具有耐藥性。M A P K信號轉導通路是細胞外信號傳遞入核的重要通路，