六種擬腎上腺素藥與三種球蛋白相互作用的研究及其應(yīng)用.pdf

1、目的：本文以三種球蛋白牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HAS)和溶菌酶(LYSO)作為模型蛋白，選擇六種擬腎上腺素藥麻黃堿、偽麻黃堿、甲基麻黃堿、沙丁胺醇、克侖特羅、特布他林作為研究對(duì)象，在模擬人體生理?xiàng)l件下，利用光譜法研究擬腎上腺素藥與三種球蛋白之間的相互作用及其分析應(yīng)用。
　　 方法：采用紫外差譜法觀(guān)察六種擬腎上腺素藥麻黃堿、偽麻黃堿、甲基麻黃堿、沙丁胺醇、克侖特羅、特布他林與三種球蛋白作用前后紫外吸收光譜的變化；利用

2、熒光光譜法考察擬腎上腺素藥與三種球蛋白的相關(guān)參數(shù)及相互作用力類(lèi)型，同時(shí)考察六種金屬離子Cu 2+、Mg 2+、Co 2+、Zn 2+、Al3+、Ni 2+對(duì)擬腎上腺素藥與三種球蛋白相互作用的影響；利用同步熒光光譜法考察擬腎上腺素藥對(duì)三種球蛋白構(gòu)象的影響；利用六種擬腎上腺素藥和人血清白蛋白的相互作用，建立熒光法測(cè)定人血清白蛋白的新方法，并應(yīng)用于生物樣品中人血清白蛋白的測(cè)定。
　　 結(jié)果：六種金屬離子與擬腎上腺素藥均形成1:1的復(fù)合

3、物；紫外結(jié)果表明：擬腎上腺素藥與三種球蛋白均發(fā)生結(jié)合作用。
　　 熒光結(jié)果表明：擬腎上腺素藥對(duì)三種球蛋白的熒光猝滅機(jī)制均為靜態(tài)猝滅和非輻射能量轉(zhuǎn)移，其作用力均為氫鍵和范德華力。麻黃堿、偽麻黃堿、甲基麻黃堿、沙丁胺醇、克侖特羅、特布他林與三種球蛋白均有一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，分別形成1:1的復(fù)合物，它們與BSA的結(jié)合常數(shù)分別為6.80×103，5.83×103，5.04×103，6.07×103，9.12×103，7.06×103 L ·m

4、oL-1，結(jié)合距離分別為0.323，0.340，0.363，0.331，0.215，0.241nm；與HAS的結(jié)合常數(shù)分別為4.38×103，4.23×103，3.14×103，2.92×103，7.52×103，5.87×103 L ·moL-1，結(jié)合距離分別為0.334，0.350，0.369，0.377，0.241，0.250nm；與LYSO的結(jié)合常數(shù)分別為5.11×103，4.04×103，2.80×103，2.40×103，7

5、.89×103，3.66×103 L ·moL-1，結(jié)合距離分別為0.320，0.322，0.349，0.396，0.269，0.332nm。
　　 同步熒光結(jié)果表明：擬腎上腺素藥與三種球蛋白的結(jié)合位點(diǎn)均靠近色氨酸，其相互作用后三種球蛋白的構(gòu)象基本不變。
　　 利用六種擬腎上腺素藥和人血清白蛋白的相互作用建立的熒光法測(cè)定生物樣品中人血清白蛋白含量，其平均回收率分別為96.4±1.9％，95.2±2.8％，100±2.9％

6、，96.4±1.4％，102±3.6％，96.1±2.5％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.0％，3.0％，2.9％，1.5％，3.5％，2.6％。
　　 結(jié)論：六種擬腎上腺素藥與三種球蛋白均發(fā)生相互作用，其相互作用后球蛋白的構(gòu)象基本不變。金屬離子的存在影響擬腎上腺素藥與三種球蛋白之間的結(jié)合常數(shù)，但作用力類(lèi)型基本不變。利用六種擬腎上腺素藥和人血清白蛋白的相互作用所建立的定量測(cè)定生物樣品中人血清白蛋白的熒光光譜法，具有操作簡(jiǎn)便、靈敏度高等優(yōu)