組蛋白去乙?；敢种苿┓⒅Z他對小鼠骨髓來源樹突狀細胞表達CCL17及誘導CD4+CD25+T細胞增殖分化的影響.pdf

1、動脈粥樣硬化引起的心腦血管疾病是目前全球患病率及死亡率最高的疾病，其內(nèi)在的炎癥免疫機制仍未被揭示完全。在動脈粥樣硬化發(fā)生的炎癥網(wǎng)絡(luò)中，樹突狀細胞在參與交通固有免疫和適應性免疫的主要細胞成分，其表達分泌的趨化因子CCL17是其間重要的細胞因子，可活化T細胞及影響調(diào)節(jié)性T細胞的增殖分化。伏立諾他，N-羥基-N'-苯基辛二酰胺，是一類組蛋白去乙?；敢种苿?，被FDA批準用于皮膚T細胞淋巴瘤的治療。伏立諾他在調(diào)控腫瘤細胞癌基因的同時，被發(fā)現(xiàn)其對

2、腫瘤細胞CCL17表達的抑制作用。
　　目的：
　　通過體外細胞學實驗探索伏立諾他對原代樹突狀細胞表達CCL17及其誘導CD4+T細胞向CD4+CD25+T細胞增殖分化的影響，以進一步明確伏立諾他的抗炎機制。
　　方法：
　　ApoE-/-小鼠的骨髓細胞在體外被GM-CSF/IL-4誘導分化成樹突狀細胞，從小鼠脾臟分離單個細胞，CD11c+、CD4+抗體磁珠分選分別獲得CD11c+樹突狀細胞及CD4+T細胞。細胞

3、培養(yǎng)體系中伏立諾他的濃度分別為0.05uM、0.1uM、0.5uM、1.0uM，在培養(yǎng)12h/24h/36h/72h回收細胞及上清。提取總RNA后反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，熒光定量PCR測定CCL17mRNA水平，ELISA法測定細胞上清中CCL17蛋白水平，抗CD4-FITC/抗CD25-PE熒光標記細胞后，通過流式細胞分析細胞分群情況。
　　結(jié)果：
　　1)體外培養(yǎng)體系中，樹突狀細胞CCL17表達量隨培養(yǎng)時間延長而顯著被抑制，

4、低濃度伏立諾他干預組CCL17的表達量較對照組顯著降低，其抑制水平與劑量無關(guān);
　　2)各組DC培養(yǎng)上清的CCL17水平在12h～72h內(nèi)無增長趨勢，伏立諾他干預組的平均蛋白水平顯著低于對照組;3）CD4+T細胞在體外被TGF-β/IL-2誘導成CD4+CD25+T細胞，DC共培養(yǎng)進一步提高誘導率，加入伏立諾他干預的共培養(yǎng)體系中細胞得率較前無明顯差異。
　　結(jié)論：
　　原代樹突狀細胞體外培養(yǎng)過程中，CCL17表達水平進