脫細(xì)胞豬闊筋膜細(xì)胞外基質(zhì)作為人闊筋膜替代材料的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：
　　闊筋膜為股部的深筋膜，其組織結(jié)構(gòu)致密，生物力學(xué)強(qiáng)度大，又具有一定的柔韌性，常作為移植物修補(bǔ)病變處的缺損。目前，臨床應(yīng)用的闊筋膜依據(jù)來(lái)源不同分為自體和同種異體兩種。自體闊筋膜為患者的自身組織，具有良好的生物相容性，但取材時(shí)難免會(huì)對(duì)患者造成醫(yī)源性創(chuàng)傷，增加病人的痛苦，且取材量受限;異體闊筋膜來(lái)源于供體，通過(guò)科學(xué)、規(guī)范的去抗原處理，具有免疫反應(yīng)輕微、材料質(zhì)地良好、移植后不易被人體吸收等特點(diǎn)，作為一種天然的生物材料在修復(fù)手術(shù)中

2、取得了良好的臨床效果。
　　隨著闊筋膜臨床應(yīng)用范圍的不斷擴(kuò)大，闊筋膜需求量日益增多，僅僅依賴患者自身或者同種異體闊筋膜難以滿足臨床需要。我們能否對(duì)異種來(lái)源的闊筋膜進(jìn)行處理應(yīng)用于臨床以緩解供需矛盾？比較各種物種，我們認(rèn)為豬來(lái)源豐富，組織器官解剖結(jié)構(gòu)類似人類，是一種常見(jiàn)的與人類同源性高的物種。研究表明，豬的不同組織經(jīng)脫細(xì)胞成功構(gòu)建了人的心臟、心臟瓣膜、角膜、血管及皮膚等。但是截至目前有關(guān)豬闊筋膜去抗原的研究較少。
　　目的：

3、r>　　利用異種來(lái)源的豬闊筋膜制備出脫細(xì)胞豬闊筋膜細(xì)胞外基質(zhì)，并根據(jù)人體對(duì)修復(fù)材料的生物力學(xué)性能和組織形態(tài)學(xué)要求，首先對(duì)其進(jìn)行生物力學(xué)性能測(cè)試，以新鮮人闊筋膜和未脫細(xì)胞處理的豬闊筋膜作為對(duì)照，檢測(cè)脫細(xì)胞處理過(guò)程是否會(huì)對(duì)其生物力學(xué)性能產(chǎn)生影響以及其生物力學(xué)性能與新鮮人闊筋膜、未脫細(xì)胞處理的豬闊筋膜是否有差異;然后在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物新西蘭大白兔體內(nèi)建立皮下埋植的動(dòng)物模型，以未脫細(xì)胞處理的豬闊筋膜和同種異體兔闊筋膜作為對(duì)照，針對(duì)埋植模型進(jìn)行大體形態(tài)觀

4、察、組織形態(tài)學(xué)觀察以及安全性評(píng)估，檢測(cè)其生物相容性，以期判定其作為人闊筋膜替代材料用于修復(fù)手術(shù)的可行性。
　　方法：
　　1、人闊筋膜及脫細(xì)胞豬闊筋膜細(xì)胞外基質(zhì)的制備及檢測(cè)
　　同種異體人闊筋膜來(lái)源于死亡后6小時(shí)之內(nèi)的新鮮供體，并且要求供體經(jīng)權(quán)威醫(yī)學(xué)機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)無(wú)感染性疾病和惡性腫瘤。豬闊筋膜來(lái)源于經(jīng)質(zhì)檢部門檢驗(yàn)檢疫確認(rèn)健康的宰殺后6小時(shí)內(nèi)剃取的豬背部闊筋膜。采用物理法和化學(xué)法對(duì)新鮮人闊筋膜和新鮮豬闊筋膜進(jìn)行去抗原處理，制

5、備出去抗原人闊筋膜、脫細(xì)胞豬闊筋膜細(xì)胞外基質(zhì)和未脫細(xì)胞豬闊筋膜，并修剪成不同規(guī)格的樣本，低溫保存?zhèn)溆谩?br>　　2、人闊筋膜與脫細(xì)胞豬闊筋膜、未脫細(xì)胞豬闊筋膜的生物力學(xué)研究
　　將人闊筋膜、脫細(xì)胞豬闊筋膜細(xì)胞外基質(zhì)和未脫細(xì)胞豬闊筋膜在生物力學(xué)測(cè)試儀上進(jìn)行拉伸試驗(yàn)，考察三種材料的抗拉強(qiáng)度、斷裂伸長(zhǎng)率等生物力學(xué)性能。
　　3、脫細(xì)胞豬闊筋膜皮下埋植動(dòng)物模型的建立與組織學(xué)觀察
　　將新西蘭大白兔隨機(jī)分為3組，每組6只，分別

6、植入人闊筋膜、未脫細(xì)胞豬闊筋膜和脫細(xì)胞豬闊筋膜細(xì)胞外基質(zhì)植片，于術(shù)后14天、30天、60天、90天分別取材。取材后分別進(jìn)行大體形態(tài)觀察和HE染色石蠟切片觀察，動(dòng)態(tài)觀察植片植入后動(dòng)物的組織反應(yīng)。
　　結(jié)果：
　　1、制備的脫細(xì)胞豬闊筋膜經(jīng)組織學(xué)檢查顯示，去除了引發(fā)免疫排斥反應(yīng)的細(xì)胞成分，保留了完整的細(xì)胞外基質(zhì)。
　　2、生物力學(xué)性能測(cè)試結(jié)果顯示，脫細(xì)胞豬闊筋膜、未脫細(xì)胞豬闊筋膜及正常人闊筋膜，三者極限抗張強(qiáng)度無(wú)顯著性差異

7、;脫細(xì)胞豬闊筋膜與正常豬闊筋膜斷裂伸長(zhǎng)率比較無(wú)顯著性差異，而兩者與正常人闊筋膜比較，斷裂伸長(zhǎng)率有顯著性差異。
　　3、隨著植入動(dòng)物體內(nèi)時(shí)間的延長(zhǎng)，脫細(xì)胞豬闊筋膜組和同種異體兔闊筋膜組的局部反應(yīng)較正常豬闊筋膜組輕，正常豬闊筋膜組局部反應(yīng)持續(xù)存在。術(shù)后90天，取材行組織病理學(xué)檢查顯示，脫細(xì)胞豬闊筋膜組與同種異體兔闊筋膜組植入的闊筋膜膠原纖維形態(tài)結(jié)構(gòu)保持良好，膠原纖維間有成纖維細(xì)胞長(zhǎng)入，僅植入物與受體交界處見(jiàn)少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn);而正常豬闊