脫細胞豬闊筋膜細胞外基質(zhì)作為人闊筋膜替代材料的實驗研究.pdf

1、背景：
　　闊筋膜為股部的深筋膜，其組織結(jié)構(gòu)致密，生物力學強度大，又具有一定的柔韌性，常作為移植物修補病變處的缺損。目前，臨床應用的闊筋膜依據(jù)來源不同分為自體和同種異體兩種。自體闊筋膜為患者的自身組織，具有良好的生物相容性，但取材時難免會對患者造成醫(yī)源性創(chuàng)傷，增加病人的痛苦，且取材量受限;異體闊筋膜來源于供體，通過科學、規(guī)范的去抗原處理，具有免疫反應輕微、材料質(zhì)地良好、移植后不易被人體吸收等特點，作為一種天然的生物材料在修復手術(shù)中

2、取得了良好的臨床效果。
　　隨著闊筋膜臨床應用范圍的不斷擴大，闊筋膜需求量日益增多，僅僅依賴患者自身或者同種異體闊筋膜難以滿足臨床需要。我們能否對異種來源的闊筋膜進行處理應用于臨床以緩解供需矛盾？比較各種物種，我們認為豬來源豐富，組織器官解剖結(jié)構(gòu)類似人類，是一種常見的與人類同源性高的物種。研究表明，豬的不同組織經(jīng)脫細胞成功構(gòu)建了人的心臟、心臟瓣膜、角膜、血管及皮膚等。但是截至目前有關(guān)豬闊筋膜去抗原的研究較少。
　　目的：

3、r>　　利用異種來源的豬闊筋膜制備出脫細胞豬闊筋膜細胞外基質(zhì)，并根據(jù)人體對修復材料的生物力學性能和組織形態(tài)學要求，首先對其進行生物力學性能測試，以新鮮人闊筋膜和未脫細胞處理的豬闊筋膜作為對照，檢測脫細胞處理過程是否會對其生物力學性能產(chǎn)生影響以及其生物力學性能與新鮮人闊筋膜、未脫細胞處理的豬闊筋膜是否有差異;然后在實驗動物新西蘭大白兔體內(nèi)建立皮下埋植的動物模型，以未脫細胞處理的豬闊筋膜和同種異體兔闊筋膜作為對照，針對埋植模型進行大體形態(tài)觀

4、察、組織形態(tài)學觀察以及安全性評估，檢測其生物相容性，以期判定其作為人闊筋膜替代材料用于修復手術(shù)的可行性。
　　方法：
　　1、人闊筋膜及脫細胞豬闊筋膜細胞外基質(zhì)的制備及檢測
　　同種異體人闊筋膜來源于死亡后6小時之內(nèi)的新鮮供體，并且要求供體經(jīng)權(quán)威醫(yī)學機構(gòu)檢驗無感染性疾病和惡性腫瘤。豬闊筋膜來源于經(jīng)質(zhì)檢部門檢驗檢疫確認健康的宰殺后6小時內(nèi)剃取的豬背部闊筋膜。采用物理法和化學法對新鮮人闊筋膜和新鮮豬闊筋膜進行去抗原處理，制

5、備出去抗原人闊筋膜、脫細胞豬闊筋膜細胞外基質(zhì)和未脫細胞豬闊筋膜，并修剪成不同規(guī)格的樣本，低溫保存?zhèn)溆谩?br>　　2、人闊筋膜與脫細胞豬闊筋膜、未脫細胞豬闊筋膜的生物力學研究
　　將人闊筋膜、脫細胞豬闊筋膜細胞外基質(zhì)和未脫細胞豬闊筋膜在生物力學測試儀上進行拉伸試驗，考察三種材料的抗拉強度、斷裂伸長率等生物力學性能。
　　3、脫細胞豬闊筋膜皮下埋植動物模型的建立與組織學觀察
　　將新西蘭大白兔隨機分為3組，每組6只，分別

6、植入人闊筋膜、未脫細胞豬闊筋膜和脫細胞豬闊筋膜細胞外基質(zhì)植片，于術(shù)后14天、30天、60天、90天分別取材。取材后分別進行大體形態(tài)觀察和HE染色石蠟切片觀察，動態(tài)觀察植片植入后動物的組織反應。
　　結(jié)果：
　　1、制備的脫細胞豬闊筋膜經(jīng)組織學檢查顯示，去除了引發(fā)免疫排斥反應的細胞成分，保留了完整的細胞外基質(zhì)。
　　2、生物力學性能測試結(jié)果顯示，脫細胞豬闊筋膜、未脫細胞豬闊筋膜及正常人闊筋膜，三者極限抗張強度無顯著性差異

7、;脫細胞豬闊筋膜與正常豬闊筋膜斷裂伸長率比較無顯著性差異，而兩者與正常人闊筋膜比較，斷裂伸長率有顯著性差異。
　　3、隨著植入動物體內(nèi)時間的延長，脫細胞豬闊筋膜組和同種異體兔闊筋膜組的局部反應較正常豬闊筋膜組輕，正常豬闊筋膜組局部反應持續(xù)存在。術(shù)后90天，取材行組織病理學檢查顯示，脫細胞豬闊筋膜組與同種異體兔闊筋膜組植入的闊筋膜膠原纖維形態(tài)結(jié)構(gòu)保持良好，膠原纖維間有成纖維細胞長入，僅植入物與受體交界處見少量炎性細胞浸潤;而正常豬闊