酶膜耦連制備米糠小分子肽工藝研究.pdf

1、本研究旨在對(duì)大米加工副產(chǎn)物米糠中蛋白進(jìn)行深加工。通過(guò)單因素和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化米糠蛋白的提取工藝。采用單因素實(shí)驗(yàn)和均勻?qū)嶒?yàn)確定堿性蛋白酶酶解米糠蛋白的最佳工藝及各因素的影響程度。探究酶解過(guò)程中的間歇?jiǎng)恿W(xué)，進(jìn)而建立動(dòng)力學(xué)方程。運(yùn)用高效液相色譜法和單因素實(shí)驗(yàn)篩選酶膜耦聯(lián)反應(yīng)所需要的超濾膜，研究酶膜耦合制備米糠小分子肽的工藝，形成具有較高副加值產(chǎn)品，改善米糠這一具有巨大價(jià)值的副產(chǎn)品被忽視的現(xiàn)狀。
　　(1)堿法提取米糠蛋白的工藝:料液比為1

2、∶10(g/g)、溫度50℃、時(shí)間2.5h，、pH9。該條件下米糠蛋白的提取率為66.47％。
　　(2)堿性蛋白酶酶解米糠蛋白條件為pH8.5、溫度65℃、酶底比0.096 AU/g（底物），均勻?qū)嶒?yàn)得到回歸方程:Y=0.06972+5.8414X2+0.009161X3-0.07819X4。擬合方程的p=0.0326＜0.05，決定系數(shù)R2=0.9934。
　　(3)堿性蛋白酶酶解米糠蛋白過(guò)程中存在產(chǎn)物抑制，不存在底物抑

3、制。主要?jiǎng)恿W(xué)參數(shù)為:Km為5.76 g· min· mmol-1， Vmax為0.67 mmol· kg-1· min-1， k2為0.28 mmol· AU-1· min-1。進(jìn)而得出酶解動(dòng)力學(xué)方程為:1/V0=56.29/[S0][E0]+1/0.28[E0]
　　(4)以透過(guò)液流量和透過(guò)液分子量分布為指標(biāo)，通過(guò)單因素試驗(yàn)和高效液相色譜法確定用來(lái)分離大米蛋白酶解產(chǎn)物應(yīng)選用的最好的超濾膜孔徑為3kDa。酶膜耦連反應(yīng)可以使米糠小