食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑硒蛋HPLC-ICP-MS檢測(cè)方法建立的研究.pdf

1、隨著元素形態(tài)分析的發(fā)展，人們逐漸認(rèn)識(shí)到，元素的有益或有害，不僅與其含量有關(guān)，更主要取決于元素存在形態(tài)及遷移轉(zhuǎn)化規(guī)律。硒是一種人體必需的微量元素之一，硒以無(wú)機(jī)硒(Se(Ⅳ)/Se(Ⅵ))和有機(jī)硒多種形態(tài)存在。無(wú)機(jī)硒毒性大，有機(jī)硒對(duì)人體有益，生物利用率高，主要以硒代蛋氨酸等形式廣泛存在于蛋白質(zhì)中，參與酶的合成。因此必須建立一套系統(tǒng)的硒含量與硒形態(tài)檢測(cè)分析方法，以規(guī)范富硒產(chǎn)品市場(chǎng)。可見(jiàn)研究元素的形態(tài)分析對(duì)于環(huán)境保護(hù)和人體健康具有重要的意義。<

2、br>　　本研究的檢驗(yàn)樣品為營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑硒蛋白，采用高效液相色譜與電感耦合等離子質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，建立一種快速、準(zhǔn)確、方便的硒濃度含量與硒形態(tài)測(cè)定的分析技術(shù)。本項(xiàng)研究的主要特點(diǎn)和成果有:
　　1.建立了HPLC-ICP-MS測(cè)定硒蛋白形態(tài)的方法。發(fā)現(xiàn)HamiltionX-100色譜柱對(duì)硒的分離效果最優(yōu)。硒元素校正曲線的相關(guān)系數(shù)R2＞0.999。SeCys2、SeCys、Se(Ⅳ)、SeMet、Se(Ⅵ)的檢出限分別為7.18μg/kg、

3、3.52μg/kg、5.80μg/L，11.22μg/L、6.63μg/L。
　　2.確立了比較適宜的硒蛋白形態(tài)分析提取方法，通過(guò)對(duì)比測(cè)試分析，在酸提法，水提法，酶解法三種前處理方法中，以酶解法的提取效率較高;
　　3.建立了最佳儀器分析條件，儀器的最佳試驗(yàn)參數(shù)為:HPLC部分（流動(dòng)相為5mmol/L的檸檬酸銨，其pH為5.5）;ICP/MS部分（質(zhì)荷比為78 m/z、射頻功率為1400 W、等離子氣流速為:18.0 L/m

4、in、霧化器流速為0.98 L/min、輔助氣流速為1.8 L/min、碰撞氣流速為60 mL/min);
　　4.經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證。對(duì)所建立的方法進(jìn)行了方法檢出限、精密度、重現(xiàn)性等試驗(yàn)，五種形態(tài)硒的檢出限分別為7.18μg/kg、3.52μg/kg、5.80μg/L，11.22μg/L、6.63μg/L;樣品加標(biāo)重復(fù)六次平行進(jìn)樣，五種形態(tài)硒的保留時(shí)間和峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在0.41％～0.67％和1.4％～3.91％之間;五種形