油菜籽生育酚和脂肪酸組分相關性研究及調(diào)控生育酚合成關鍵基因的等位多態(tài)性分析.pdf

1、油菜（尤其是甘藍型油菜）是當今世界上最重要的油料作物之一。菜籽油的營養(yǎng)品質(zhì)主要取決于其脂肪酸的相對組成。高油酸和高亞油酸的脂肪酸構成由于兼顧植物油營養(yǎng)與煎炒的優(yōu)點而更受人們所青睞。除脂肪酸的構成以外，菜籽油中維生素E的含量及組成（高維生素E總含量和高α-/γ-生育酚比率）也是菜籽油脂品質(zhì)評價的重要指標。
　　 維生素E是一種只能由光合生物合成的脂溶性維生素，其存在可以有效的防止動植物體內(nèi)多不飽和脂肪酸的過氧化。維生素E的適當攝入

2、為人類和其它多數(shù)哺乳動物維持自身正常生理功能所必需。其適當攝入可以有效預防心血管疾病，其攝入的缺乏會誘導神經(jīng)功能障礙、肌肉萎縮等病癥的發(fā)生。維生素E包括生育酚和三烯生育酚兩大類。兩類生育酚類物質(zhì)均具有維生命E生物活性。在種子油脂（例如菜籽油）當中，以生育酚的含量居多，三烯生育酚則較少或難以檢測。依據(jù)芳香環(huán)上甲基的數(shù)目和位置不同，生育酚又可劃分為α-、β-、γ-、δ-四種亞型。四種亞型生育酚當中以α-型的維生素E生物活性最高;就食用油中的

3、抗氧化能力而言，則以γ-型最強。
　　 集高油酸、亞油酸、高α-/γ-生育酚比率以及高總生育酚含量等眾多優(yōu)良品質(zhì)于一身的菜籽品質(zhì)是現(xiàn)代油菜育種的重要目標。然而，目前有關菜籽中脂肪酸與生育酚組分相互關系的研究報道尚不多見。以植物生育酚合成途徑中的關鍵酶基因作為候選基因來研究該些關鍵基因的等位多態(tài)性及其與籽粒生育酚品質(zhì)相互關系的研究亦鮮有報道。鑒于上述現(xiàn)狀，本論文的研究主要基于以下兩方面展開，其主要內(nèi)容與結論如下:
　　 以

4、收集到的具有廣泛變異的，來自甘藍型、白菜型以及芥菜型三個種的油萊種質(zhì)資源（其中162份為地方品種，15份為低芥酸選育品種）為材料，研究了菜籽中脂肪酸與生育酚組分的相關性。經(jīng)統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，在三個由地方品種所組成的種群材料之間存在著一些顯著的共同規(guī)律:α-T與C18∶1+C18∶2均呈現(xiàn)出顯著的正相關，與C18∶3以及VLCFA均未呈現(xiàn)出顯著的正相關;γ-T與所有的脂肪酸組分幾乎均未呈現(xiàn)出顯著的相關性。結果表明α-T與脂肪酸組分的相關性可能

5、并非基于生育酚的抗氧化性質(zhì)，而是可能源自于α-T對脂肪酸內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上生物合成途徑的調(diào)控。
　　 通過運用25對內(nèi)含子多態(tài)性標記引物檢測了83份甘藍型油菜品種中6個生育酚生物合成途徑關鍵酶基因（BnaX.PDS1.b，BnaX.VTE1.a，BnaA.VTE2.a，BnaX.VTE3.a，BnaX.VTE4.b，BnaC.VTE5）的內(nèi)含子等位多態(tài)性。經(jīng)PCR擴增和高分辨率凝膠毛細管電泳鑒定，在依據(jù)六個候選基因所設計的IP標記引物當中

6、，每個候選基因至少有一對相對應的引物在83份群體材料當中擴增出了3或4個清晰的可識別電泳條帶，表明每個候選基因最多可以在甘藍型油菜中擴增出3或4個拷貝（平均3.83個拷貝）。經(jīng)基于Q+K模型的關聯(lián)統(tǒng)計分析，在所有具有顯隱性差異的49個基因位點上，最終有6個位點與生育酚性狀（總含量或組分構成）產(chǎn)生了顯著性關聯(lián)(P＞0.05)。所有具備關聯(lián)性的位點當中，以分子標記PDS1-IP1(F/R)（329bp凝膠電泳條帶）對性狀的解析率最為顯著，它