新型水溶性羥基喜樹堿環(huán)烷胺醇衍生物的合成與生物學(xué)初評(píng).pdf

1、DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ(TopoisomeraseⅠ，TopoⅠ)在生物體內(nèi)具有重要的作用，它能夠參與DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、重組和修復(fù)等多個(gè)過程，是抗腫瘤藥物作用的重要靶點(diǎn)。喜樹堿衍生物是目前唯一應(yīng)用于臨床的TopoⅠ抑制劑類抗腫瘤藥物，其作用機(jī)制明確，抗癌活性強(qiáng)，廣譜與無交叉耐藥性等突出優(yōu)點(diǎn)，但是它仍存在嘔吐腹瀉和骨髓抑制等嚴(yán)重的不良反應(yīng)。
　　本文以羥基喜樹堿(HCPT)為先導(dǎo)化合物，與甲醛和環(huán)烷胺醇，在冰醋酸溶液中，經(jīng)過Manni

2、ch縮合反應(yīng)，得到3種新結(jié)構(gòu)類型的水溶性HCPT環(huán)烷胺醇衍生物，分別為羥基喜樹堿脯氨醇(PRPT)，羥基喜樹堿哌啶醇(PPPT)和羥基喜樹堿哌嗪乙醇(QPPT)，并制備了他們的氧化物9-亞甲基-10-羰基CPT，并對(duì)其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。對(duì)Mannich反應(yīng)中的主要影響因素進(jìn)行了初步考察，并依據(jù)LC-MS對(duì)有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析，設(shè)計(jì)優(yōu)化了合成工藝與純化條件。
　　對(duì)HCPT環(huán)烷胺醇衍生物進(jìn)行了初步的生物學(xué)評(píng)價(jià)。PPPT和PRPT在血漿

3、中內(nèi)酯型/羧酸型比例較為合適，與對(duì)照藥拓?fù)涮婵?TPT)接近，均優(yōu)于HCPT; PPPT和PRPT在PBS和辛醇中的溶解度遠(yuǎn)優(yōu)于TPT和HCPT。
　　采用LC-MS法對(duì)HCPT環(huán)烷胺醇衍生物在大鼠體內(nèi)藥物代謝物進(jìn)行了初步研究。結(jié)果表明主要代謝途徑是捕獲細(xì)胞內(nèi)氧自由基，同時(shí)產(chǎn)生H2O2。PRPT被氫化還原水解代謝成M396，其次為硫酸化、乙?；?、甲基化等，尿中原型藥物約占28％。PPPT20％被代謝成9-亞甲基-10-羰基CPT，

4、尿中原形藥物占80％，無其他代謝物。QPPT尿中100％被代謝成9-亞甲基-10-羰基CPT，幾乎無原形藥物和其他代謝物。結(jié)果表明HCPT環(huán)烷胺醇衍生物這種特殊的代謝途徑可能與提高細(xì)胞內(nèi)H2O2濃度有關(guān)。其中PRPT和PPPT代謝性質(zhì)較為優(yōu)良。
　　建立了PF1選擇性熒光探針測(cè)定細(xì)胞內(nèi)H2O2的方法。H2O2在3.1-100μM濃度范圍內(nèi)，曲線關(guān)系良好。結(jié)果表明PRPT和PPPT均可以提高細(xì)胞內(nèi)H2O2濃度，選擇性誘導(dǎo)MCF-7和