莫西沙星在中國(guó)健康受試者體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)及在全面QT試驗(yàn)中作用的研究.pdf

1、第一、二部分莫西沙星人體內(nèi)定量分析方法的建立及其在中國(guó)健康受試者體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)
　　 目的：
　　 本試驗(yàn)研究擬建立測(cè)定人體內(nèi)血漿中莫西沙星含量的高效液相色譜-質(zhì)譜串聯(lián)法(LC-MS/MS)定量分析方法，并且測(cè)定48名健康受試者連續(xù)四天單劑量口服400mg莫西沙星片后的血藥濃度，從而進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)分析，為臨床合理用藥提供充分理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 采用甲醇沉淀蛋白法對(duì)血漿中的待測(cè)藥物莫西沙星

2、和內(nèi)標(biāo)左氧氟沙星進(jìn)行提取，用ZORBAXEP-C18(4.6×100mm，5μm粒徑)色譜柱進(jìn)行色譜分離，流動(dòng)相為甲醇:水（50∶50，v/v），流速為0.2mL·min-1;進(jìn)樣量為10μL;柱溫為25℃。質(zhì)譜監(jiān)測(cè)系統(tǒng)采用ESI（電噴霧離子化源）正離子檢測(cè)模式，在MRM（多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)）模式下，莫西沙星和左氧氟沙星的定量離子對(duì)分別為m/z402.1→m/z384.3(F=120V,CE=25)和為m/z362.4→m/z261.2(F=

3、135,CE=35)。根據(jù)FDA生物樣品分析方法學(xué)指南，考察莫西沙星血漿樣品的方法學(xué)特異性、精密度、準(zhǔn)確度、線性、定量下限、生物基質(zhì)效應(yīng)、穩(wěn)定性和回收率等，本實(shí)驗(yàn)研究對(duì)該方法進(jìn)行了完整的方法學(xué)確證。
　　 試驗(yàn)中48名健康受試者分別連續(xù)四天單劑量口服400mg莫西沙星后，在給藥周期的給藥的第二、三天分別留取給藥前(0h)和給藥后(1.5h)，第四天留取給藥前(0h)和給藥后不同時(shí)間點(diǎn)(給藥后0.5h，1h，1.5h，2h，3h，

4、4h，6h，9h，12h，24h)的前臂靜脈留置針采集血液標(biāo)本4mL，應(yīng)用本研究建立的分析方法測(cè)定給藥后不同時(shí)間點(diǎn)莫西沙星的血藥濃度，用WinNonlin(Phoenix)5.2.1軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理，采用非房室模型法評(píng)估各項(xiàng)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
　　 結(jié)果：
　　 本試驗(yàn)建立了測(cè)定人血漿中莫西沙星含量的LC-MS/MS分析方法，并且進(jìn)行了連續(xù)四天單劑量口服莫西沙星400mg的人體藥代動(dòng)力學(xué)研究。
　　 本方法的線

5、性范圍為50～10000ng·mL-1，最低定量限(LLOQ)為50ng·mL-1，提取回收率在85.76％～105.36％之間，準(zhǔn)確度在80.56％～116.17％之間，日內(nèi)、日間精密度（RSD）分別小于5.76％和8.75％;樣品前處理方案能夠?qū)Υ郎y(cè)物莫西沙星和左氧氟沙星進(jìn)行有效提取，并且基質(zhì)效應(yīng)較小;線性范圍內(nèi)，血漿中無內(nèi)源性物質(zhì)干擾;在實(shí)驗(yàn)方案中設(shè)定的各種考察條件下，莫西沙星均有較好的穩(wěn)定性。方法學(xué)確證結(jié)果表明，該分析方法符合S

6、FDA生物樣品分析方法有關(guān)指南相關(guān)要求，適用于莫西沙星人體藥代動(dòng)力學(xué)研究。48名健康受試者口服莫西沙星后的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)如下:AUC0-24(58242.84±18213.18)ng·h·mL-1，AUC0-∞(78263.58±25394.13)ng·h·mL-1,T1/2(11.71±3.53)h,Cmax(5158.99±1918.38)ng·mL-1,Tmax(74.94±1.41)h,MRT0-24(18.02±4.45)

7、h,CLz/F(8420.09±7524.04)mL·h-1，Ke（0.06±0.2）。受試者連續(xù)四天口服莫西沙星400mg是安全的，可耐受的。
　　 結(jié)論：
　　 本研究建立的LC-MS/MS法可用于莫西沙星的藥代動(dòng)力學(xué)研究。我國(guó)48例健康志愿者連續(xù)單劑量口服莫西沙星具有血藥峰濃度高、半衰期長(zhǎng)、耐受性好的特點(diǎn)，單劑量口服400mg莫西沙星可達(dá)到并維持有效血藥濃度。
　　 第三部分莫西沙星在全面QT試驗(yàn)中作用的研

8、究
　　 目的：
　　 與安慰劑比較，在健康受試者中評(píng)價(jià)莫西沙星(400mg，QD)單次給藥和連續(xù)給藥的穩(wěn)態(tài)血藥濃度對(duì)QT/QTc間期和心律的影響。評(píng)價(jià)莫西沙星在受試者體內(nèi)連續(xù)給藥的心臟毒性，以期對(duì)莫西沙星進(jìn)行安全性研究全面了解和不斷完善，及時(shí)調(diào)整臨床給藥策略，為臨床用藥提供試驗(yàn)依據(jù)。并為其在全面QT研究中作為陽性對(duì)照藥提供參考和依據(jù)，同時(shí)為國(guó)內(nèi)臨床研究中心進(jìn)行TQT研究的驗(yàn)證方法和TQT實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)及結(jié)果評(píng)估等方面提供

9、借鑒和參考。
　　 方法：
　　 按照ICHE14原則，在健康志愿者體內(nèi)進(jìn)行連續(xù)四天口服400mg莫西沙星和安慰劑對(duì)QT/QTc間期影響的臨床試驗(yàn)研究。共入選48名受試者，男女各半，分6組，每組8例。隨機(jī)編盲，根據(jù)性別分層，采用DAS統(tǒng)計(jì)軟件包按1∶1∶1∶1的比例產(chǎn)生隨機(jī)編碼。
　　 所有受試者按隨機(jī)碼指定的給藥順序分別接受研究藥物和安慰劑，間隔清洗期五天（以前一個(gè)周期研究的結(jié)束日計(jì)算）。為了解QT/QTc間期

10、和心律的變化及與藥物血藥濃度的相關(guān)關(guān)系，在進(jìn)行QT/QTc間期和心律影響評(píng)價(jià)的同時(shí)，采集一定時(shí)間點(diǎn)的血藥濃度，觀察藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)以及藥物濃度與QT/QTc間期的關(guān)系。
　　 在整個(gè)研究過程中，每位受試者每次在臥位靜息5分鐘后進(jìn)行描記，連續(xù)描記3次，每次描記至少5次完整的心跳，至少描記10s。同時(shí)做長(zhǎng)Ⅱ?qū)?lián)ECG描記。如與采血時(shí)間沖突，先描記心電圖，再采血。心電圖描記參數(shù)必須一致。心電圖分析方法為機(jī)器分析。
　　 本臨床試

11、驗(yàn)所有數(shù)據(jù)采用WinNonlin5.2.1(Phoenix)軟件計(jì)算分析藥代動(dòng)力參數(shù)，SPSS17.0軟件分析數(shù)據(jù)。
　　 結(jié)果：
　　 48例受試者中，其平均年齡為24.88±2.94歲，平均身高為165.47±8.08厘米，平均體重為59.28±7.74kg，平均BMI為21.58±1.62。比較每例受試者給藥前后的生命體征測(cè)量結(jié)果，沒有發(fā)現(xiàn)具有臨床意義的改變，受試者心率沒有明顯改變。①機(jī)讀QT/QTc間期結(jié)果分析:

12、分析給藥四天后穩(wěn)態(tài)血藥濃度時(shí)ΔΔQTcF，給藥后2-4小時(shí)達(dá)到最大對(duì)比時(shí)間平均QTc作用，95％CI為[15.07，0.25]，判定本次QT研究結(jié)果為陽性;②等級(jí)分類結(jié)果分析，給藥第1至4天后，莫西沙星組的QTcF間期(ms)與基線（給藥后-基線）比較，莫西沙星組有23例QTcF間期的改變?cè)冢?0-60ms;莫西沙星組沒有QTcF間期改變?cè)冢?0ms。機(jī)讀QT/QTc絕對(duì)時(shí)間分析結(jié)果顯示，共25例受試者給藥前/后和/或后的QT延長(zhǎng)超過4

13、50ms，但均在正常范圍內(nèi)，不會(huì)危及生命。
　　 在整個(gè)試驗(yàn)研究過程中共有19人次受試者出現(xiàn)不良事件，主要表現(xiàn)為頭暈、惡心、嘔吐、血糖降低、過敏、AST或ALT升高、竇性心動(dòng)過緩及QTc間期延長(zhǎng)等，除一例受試者發(fā)生過敏反應(yīng)與研究藥物有關(guān)外，其余的不良事件均可考慮不能排除與研究藥物的關(guān)系。通過對(duì)血藥濃度和QTc相關(guān)性分析，結(jié)果表明莫西沙星與QTc間期之間沒有明顯的相關(guān)性。
　　 結(jié)論：
　　 莫西沙星可以引起受試者