獸疫鏈球菌(Streptococcus zooepidemicus)發(fā)酵生產(chǎn)透明質(zhì)酸工藝條件研究.pdf

1、本文以獸疫鏈球菌（Streptococcuszooepidemicus）為菌種，進(jìn)行透明質(zhì)酸發(fā)酵條件研究。首先進(jìn)行搖瓶發(fā)酵條件的優(yōu)化，包括搖瓶培養(yǎng)溫度、pH、裝液量、發(fā)酵時(shí)間的優(yōu)化;其次進(jìn)行搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，通過響應(yīng)面法分析得到主效成分葡萄糖和酵母膏的最佳濃度;最后對(duì)透明質(zhì)酸小型發(fā)酵罐的發(fā)酵條件進(jìn)行研究，通過上述實(shí)驗(yàn)旨在為透明質(zhì)酸進(jìn)一步的大規(guī)模生產(chǎn)提供參考，具體結(jié)果如下:
　　1、為了進(jìn)一步提高獸疫鏈球菌發(fā)酵生產(chǎn)透明質(zhì)酸產(chǎn)

2、量，通過控制溫度、pH、發(fā)酵時(shí)間、裝液量來優(yōu)化搖瓶發(fā)酵條件。通過單因素試驗(yàn)得出最適pH，最適溫度，最適發(fā)酵時(shí)間，最適裝液量。搖瓶培養(yǎng)在36℃下菌體量最多，在37℃下透明質(zhì)酸產(chǎn)量最高;在pH7.0時(shí)菌體量及透明質(zhì)酸產(chǎn)量都達(dá)到最高;發(fā)酵時(shí)間在24h是透明質(zhì)酸產(chǎn)量最高，菌體量最多;裝液量在40％時(shí)，透明質(zhì)酸產(chǎn)量最高，菌體量最多。
　　2、利用Plaekett-Burman設(shè)計(jì)及響應(yīng)面分析法(RSM)對(duì)透明質(zhì)酸產(chǎn)生菌搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化

3、，確定了影響透明質(zhì)酸產(chǎn)量的關(guān)鍵因子為葡萄糖和酵母膏，經(jīng)過分析得到葡萄糖最佳濃度為55.78g/L，酵母膏最佳濃度為23.43g/L。通過對(duì)培養(yǎng)基的優(yōu)化，透明質(zhì)酸產(chǎn)量得到提高，實(shí)驗(yàn)值與預(yù)測(cè)值基本一致。
　　3、試驗(yàn)在5L發(fā)酵罐中，通過不同通氣量、不同攪拌轉(zhuǎn)速以及不同發(fā)酵溫度進(jìn)行透明質(zhì)酸發(fā)酵單因素試驗(yàn)，結(jié)果表明:小型發(fā)酵罐透明質(zhì)酸發(fā)酵最佳通氣量為3L/min，攪拌轉(zhuǎn)速為200r/min，最適宜溫度采用分段控制，發(fā)酵前18h控制在36℃