Beijerinckia indica BY-3菌株IAA合成能力與途徑的研究.pdf

1、本研究是以植物根系周圍土壤中產(chǎn)IAA的自生固氮菌為研究對象，目的是分離篩選得到高產(chǎn)IAA的固氮菌株，研究結(jié)果應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域，可以減少化學(xué)肥料施用，降低水體富營養(yǎng)化程度，促進植物生長，保護生態(tài)環(huán)境。
　　從采集自上海奉賢海灣地區(qū)不同生態(tài)環(huán)境中的土壤樣品里分離篩選得到13株自生固氮菌，經(jīng)純化后搖瓶培養(yǎng)并測定其發(fā)酵液中IAA含量，其中BY-3菌株的IAA產(chǎn)量達到了52.58mg/L。BY-3菌株經(jīng)革蘭氏染色為陰性，在Ashby甘露醇

2、培養(yǎng)基上形成淡乳黃色的巨大菌落，剛形成時菌落表面光滑，而后折疊，形成皺紋或皺褶的表面。經(jīng)測序其16SrDNA長度為1436bp，鑒定為Beijerinckiaindica。
　　單因素實驗優(yōu)化結(jié)果表明，BY-3菌在搖床轉(zhuǎn)速250r/min，培養(yǎng)溫度30℃，接種細胞密度OD6000.40，pH5.0、添加微量鉬鐵鹽時最宜生長，同時IAA合成產(chǎn)量也最高。
　　通過采用不同的樣品處理方法、不同的提取劑和不同的流動相體系，組合優(yōu)化提

3、取條件和色譜條件，進一步提高IAA含量測定方法的準確性，得出IAA的HPLC檢測方法具有操作簡便、精密度高、回收率好等優(yōu)點。其色譜條件為，色譜柱是安捷倫ZORBAXEclipseXDB-C18柱（250mm*4.6mm）;流動相是乙腈-2％醋酸水溶液（體積比1∶4）;流速為1.0ml/min;紫外檢測波長是280nm;柱溫是30℃;進樣量為10ul;提取劑選擇的是乙酸乙酯。在IAA標樣圖譜中IAA的出峰時間為5.803min，在菌株發(fā)酵