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文檔簡介
1、本研究對高產(chǎn)谷胱甘肽產(chǎn)生菌的選育以及對生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)谷胱甘肽的生產(chǎn)條件進行了探索。
首先對畢赤酵母的的破壁條件進行了系統(tǒng)優(yōu)化，通過對各種破壁方法及各種工藝參數(shù)條件下谷胱甘肽抽提率的對比，最后確定采用酸結(jié)合水浴的方式，谷胱甘肽產(chǎn)物的一次破出率達到95％左右。
采用經(jīng)過基因工程改造的GS115畢赤酵母菌株作為出發(fā)菌株，采用UV結(jié)合EMS誘變，通過篩選博來霉素抗性菌株的策略，選育得到高產(chǎn)菌株HS178-1。該菌株比出發(fā)菌株
2、的單位菌體GSH產(chǎn)量提高了將近100％，并且具有良好的傳代穩(wěn)定性。
在搖瓶水平上對GSH的轉(zhuǎn)化條件進行優(yōu)化，確定最佳轉(zhuǎn)化條件為:發(fā)酵28-40h，即菌體量達到最大量后，調(diào)節(jié)料液的pH到6.5-6.8之間，同時補入0.8％（終濃度）葡萄糖作為轉(zhuǎn)化能量來源，同時補入6mmol/L半胱氨酸、2mmol/L谷氨酸（可用谷氨酸鈉）、2mmol/L甘氨酸，于28℃，250rpm轉(zhuǎn)化6h，可獲得最佳轉(zhuǎn)化效果，轉(zhuǎn)化后GSH含量達到1732μg
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