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文檔簡介
1、本實驗以核桃仁為主要原料,首先在機械破碎的基礎(chǔ)上,采用三酶復(fù)合法對經(jīng)索氏提取去油的核桃粕進行酶解,以多肽含量及酶解液對DPPH的清除率為指標(biāo),篩選出該酶解的最佳復(fù)合蛋白酶;其次研究復(fù)合蛋白酶的添加量、核桃粗蛋白濃度、酶解溫度、酶解液pH和酶解時間對酶解效果的影響,并采用正交試驗優(yōu)化其工藝條件;然后將核桃粕酶解產(chǎn)物經(jīng)過Sephadex G-25凝膠層析柱進行分離,對其分子量分布及各分離組分的O2-·清除率、·OH清除率、DPPH·清除率和
2、總抗氧化能力進行研究,對具有較強抗氧化活性的分離組分進行富集并冷凍干燥制成營養(yǎng)型核桃多肽粉。
實驗結(jié)果顯示:
中性蛋白酶、堿性蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶按1∶2∶3復(fù)配時為酶解核桃粕的最佳復(fù)合酶,最佳酶解條件為:酶濃度為5000U/g,底物濃度為3%,溫度為65℃,pH為7.2,酶解時間為5h。在該實驗條件下,核桃粕復(fù)合酶解液的多肽濃度為1.30mg/ml,DPPH清除率為93%。
Sephadex G-25凝膠層
3、析柱分離出的具有較強抗氧化性的多肽片段的分子量主要集中于5733~307u之間。此分子量段的多肽占整個多肽含量的47.95%;該片段的O2-·清除率為40.54%,比最大的清除率低12%,但0H·清除率、DPPH·清除率和總抗氧化能力均最大,分別為65%、96%和95u/ml。
蔗糖脂肪酸酯為富集物合適的乳化劑,其添加量為4%;穩(wěn)定劑為β-環(huán)狀糊精,其添加量為1.4%,核桃多肽真空濃縮的適宜條件為:濃縮溫度70℃,真空度0.0
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