頭孢霉DT06多糖提取及抗氧化性測(cè)定.pdf

1、頭孢霉DT06是單細(xì)胞藍(lán)藻Chroococcus.sp.的共生真菌，除產(chǎn)生抗生素還產(chǎn)出一定量的胞內(nèi)和胞外多糖。真菌多糖具備廣泛的生物活性具備顯著的藥理作用，有著無毒無副作用等優(yōu)點(diǎn)，是近年來研究的熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)的目的確定多糖制備和提取的最佳條件，測(cè)定胞外胞內(nèi)多糖的抗氧化性。本實(shí)驗(yàn)研究?jī)?nèi)容如下：
　　頭孢霉DT06胞外多糖的制備，提取和抗氧化性的測(cè)定：本實(shí)驗(yàn)分別以PDA培養(yǎng)基，查氏培養(yǎng)基和沙氏培養(yǎng)基作為發(fā)酵培養(yǎng)基，不同溫度下培養(yǎng)5-7天

2、，并使用95％乙醇沉淀得到胞外多糖粗品，純化后根據(jù)所得胞外多糖量的大小，確定了發(fā)酵的最適條件，即查氏培養(yǎng)基在30oC下培養(yǎng)7天，所得胞外多糖含量為2.11±0.2（g/L）。抗氧化性的表征，測(cè)定多糖對(duì)羥基自由基(·OH)和超氧陰離子(O2·-)的清除率，同時(shí)對(duì)比除蛋白前后清除率，多糖的清除率分別為43.80%，47.68%。
　　頭孢霉DT06脂溶性和水溶性提取物抗氧化性的分析：本實(shí)驗(yàn)對(duì)比來自不同培養(yǎng)基所得菌絲的脂溶性和水溶性物質(zhì)

3、的抗氧化性，為下一步胞內(nèi)多糖的研究提供理論依據(jù)。菌絲破壁后使用蒸餾水和不同濃度的甲醇，乙醇分別進(jìn)行提取，并對(duì)提取液進(jìn)行抗氧化性表征，實(shí)驗(yàn)表明30oC水提條件下，對(duì)羥基自由基的清除率最高，可達(dá)88.0%。
　　頭孢霉DT06胞內(nèi)多糖的制備提取和抗氧化性的測(cè)定：本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)比在不同發(fā)酵條件下所得的菌絲量大小及所得胞內(nèi)多糖含量確定胞內(nèi)多糖的最佳發(fā)酵條件，得最大生物量為9.03±0.4g。在提取過程中找到最佳的提取條件和方法，頭孢霉菌絲體

4、的烘干溫度為40oC，破壁方法為超聲破壁，通過單因子實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)，確定最優(yōu)熱提條件：提取溫度90oC，熱提時(shí)間6h，乙醇含量95%，乙醇沉淀時(shí)間4h，胞內(nèi)多糖最大含量為6.02±0.3%（w/w）。清除羥基自由基為54.20%，清除超氧陰離子為51.04%。
　　通過對(duì)比胞內(nèi)外多糖的含量和抗氧化性的強(qiáng)弱，表明在單次發(fā)酵的條件下，所得胞外多糖的量高于胞內(nèi)多糖，同時(shí)在抗氧化性方面，胞內(nèi)多糖略高于胞外多糖。由此得出，頭孢霉DT06不但