沙棘多糖的提取純化、結(jié)構(gòu)鑒定及其抗氧化性的研究.pdf

1、本文以黑龍江省農(nóng)科院漿果研究所培育的大果沙棘HS-4、HS-12、HS-15、HS-19、HS-21、HS-22、綏棘2號、綏棘3號、優(yōu)勝、楚伊、卡圖尼、渾金、豐產(chǎn)、巨人、烏蘭格木、橙色、金色共十七個品種為試材，對沙棘多糖的提取方法，純化工藝，精多糖的分級、分子量、結(jié)構(gòu)及抗氧化性進行了研究。 在沙棘多糖的提取過程中，以大果沙棘HS-12為試材，首先分別對木瓜蛋白酶提取法和超聲波提取法進行研究，確定這兩種提取方法的最佳提取工藝；然

2、后將這兩種方法以不同方式結(jié)合，并最終確定沙棘多糖的最佳提取條件。在單因素試驗基礎(chǔ)上，采用正交試驗得到木瓜蛋白酶的最佳提取工藝為：加酶量2％，pH值5.5，提取溫度45℃，提取時間20min，多糖提取量44.28mg/g；超聲波法提取多糖的最佳條件為：超聲功率480W，超聲時間55min，固液比1∶20，提取量48.63mg/g。在此基礎(chǔ)上將這兩種方法以不同方式進行結(jié)合：超聲波法與酶法同時進行提取，提取量為53.30mg/g；先進行超聲波

3、提取而后進行酶法提取，提取量為54.68mg/g。將這兩種提取方法進行比較：超聲波法與酶法同時進行提取方法的多糖提取量最高，但從節(jié)省時間等因素綜合考慮最終選擇超聲波法與酶法同時進行提取的方法為最佳提取方案。 在脫蛋白工藝研究中，比較了Sevag法(10次)、木瓜蛋白酶法與木瓜蛋白酶+Sevag法(3次)三種脫蛋白方法的效果。蛋白質(zhì)去除率分別為51.10％、50.18％、88.17％；多糖提取量分別為2.51mg/g、54.30m

4、g/g和48.56mg/g。從蛋白去除率和多糖提取量兩方面綜合考慮，確定木瓜蛋白酶與Sevag法結(jié)合作用為除蛋白最佳工藝。 采用最佳提取條件，測定了十七個沙棘品種的多糖含量，發(fā)現(xiàn)不同品種的大果沙棘多糖含量相差巨大。HS-12的多糖含量最高為54.30mg/g，橙色的多糖含量僅為0.75mg/g，此研究對選育多糖含量較高的沙棘品種具有參考價值。 將脫色透析后的沙棘粗多糖通過DEAE-纖維素柱進行分級，得到兩個級分，其中一個

5、級分HⅡ含量很高為沙棘多糖的主要成分。將此沙棘多糖級分進行SepharoseCL-4B凝膠柱層析，得單一對稱峰；通過紫外分光光度法測定，得單一對稱峰；采用凍融分析得一均一淡黃色透明液體，由此證明HⅡ為均一組分。 通過粘度法測得此精多糖分子量為10.94×104；通過紅外光譜分析可知其糖苷鍵即有α構(gòu)型同時也具有β型；將其進行酸水解而后，進行紙色譜和薄層色譜分析測得其單糖組成含有木糖、葡萄糖、半乳糖。 分別采用DPPH自由基