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文檔簡介
1、本文依據(jù)基元模式分析預(yù)測結(jié)果，提出構(gòu)建工程菌株的代謝途徑修飾策略。本工作以工業(yè)菌株KAM-2(MATα urα3)為出發(fā)菌株分別缺失基因FPS1、GPD1、GPD2和過量表達基因GLT1，依據(jù)酵母等位基因分離方法獲得兩基因工程菌株KAM-14(MATa ura3 fps1△∷REPEAT gpd1△∷REPEAT PPGK1-GLT1)和KAM-15(MATa ura3 fps1△∷REPEATgpd2△∷REPEATPpGK1-GLT
2、1)。
對KAM-14、KAM-15與KAM-2進行厭氧發(fā)酵實驗，測定發(fā)酵菌株的OD值、葡萄糖消耗量、甘油、乙醇、乙酸和丙酮酸的生成量。實驗結(jié)果表明，與KAM-2相比，KAM-14和KAM-15發(fā)酵的OD值和耗糖量差別不大。同時KAM-14和KAM-15的甘油生成量分別降低39.21％和37.02％，乙醇產(chǎn)量則分別提高12.65％和11.64％；乙酸和丙酮酸產(chǎn)量都顯著降低。
依據(jù)酵母代謝通量模型分別計算在厭氧
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