丹參酮ⅡA磺酸鈉在實驗性冠脈無復(fù)流中的作用及機制的研究.pdf

1、目的：觀察丹參酮ⅡA磺酸鈉（STS）對大鼠心肌缺血再灌注后冠脈無復(fù)流的影響，觀察STS對心肌組織和冠脈微血管血管內(nèi)皮細胞fgl2凝血酶原酶的表達的影響，探討STS在實驗性無復(fù)流中的作用及機制。
　　方法：①通過生理鹽水或STS預(yù)處理后，建立大鼠急性心肌缺血45min再灌注72h實驗性冠脈無復(fù)流模型；通過硫磺素S、伊文氏藍和TTC染色觀察各組大鼠心臟的無復(fù)流面積和梗死面積。②通過Western Blot檢測STS對心臟組織fgl2、

2、纖維蛋白表達水平的影響；免疫組化技術(shù)評價各組心臟微血管內(nèi)皮細胞 fgl2表達情況；通過纖維蛋白卡斯塔萊斯特（carstairs）和MSB特染法評估各組心臟微血管內(nèi)纖維蛋白血栓的形成差異；③通過Western Blot及免疫組化評估各組凝血酶受體 PA R-1活化和炎癥細胞浸潤程度的差異。④免疫熒光技術(shù)鑒定原代培養(yǎng)心肌微血管內(nèi)皮細胞，用不同濃度STS預(yù)處理，通過Western Blot和免疫熒光技術(shù)觀察TNF-α刺激后的微血管內(nèi)皮細胞fg

3、l2表達的變化。
　　結(jié)果：①硫磺素S、伊文氏藍和TTC染色顯示，給予STS處理的大鼠與對照組相比，梗死面積和無復(fù)流面積均得到明顯減小。②心臟組織western blot和免疫組化結(jié)果顯示STS下調(diào)MI/R后心臟組織和微血管內(nèi)皮細胞fgl2蛋白的表達；心臟組織western blot和纖維蛋白特染結(jié)果顯示丹參酮ⅡA磺酸鈉減少纖維蛋白的沉積和微血栓的生成。③western blot和組化結(jié)果說明STS抑制PAR-1的活化并能改善炎癥

4、細胞的浸潤。④經(jīng)免疫熒光鑒定顯示培養(yǎng)出原代心肌微血管內(nèi)皮細胞純度可達90％以上；western blot和免疫熒光結(jié)果顯示TNF-α刺激后可上調(diào)細胞fgl2表達，STS濃度依賴性下調(diào)TNF-α刺激后細胞fgl2的表達。
　　結(jié)論：①STS顯著減小實驗性冠脈無復(fù)流面積。②STS下調(diào)實驗性冠脈無復(fù)流大鼠心臟組織和冠脈微血管內(nèi)皮細胞fgl2凝血酶原酶的表達；可下調(diào)纖維蛋白沉積而減少心臟微血管內(nèi)原位血栓形成。③STS可抑制凝血酶受體（PA