視黃酸受體α在膽管癌發(fā)生發(fā)展中的作用及機(jī)理研究.pdf

1、臨床上膽管癌的發(fā)病率日益增高，且生長(zhǎng)速度快、侵襲力強(qiáng)。手術(shù)加放、化療的綜合治療已成為其治療的主要方法，但膽管癌對(duì)放化療敏感度低、抵抗力強(qiáng)，副作用明顯等特點(diǎn)嚴(yán)重限制了放化療藥物的臨床使用。因此，深入研究膽管癌發(fā)生發(fā)展具有重要的意義。本文主要以體外培養(yǎng)的三株人膽管癌QBC939、SK-ChA-1和HCcc9810細(xì)胞為研究對(duì)象，闡明RARα參與膽管癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制，為膽管癌的基因靶向治療提供新策略，為尋找膽管癌早期診斷指標(biāo)及臨床基因治療

2、靶點(diǎn)提供科學(xué)依據(jù)。
　　本文主要運(yùn)用免疫組織化學(xué)、Westernblot、RT-PCR等方法研究膽管癌臨床標(biāo)本和膽管癌細(xì)胞中RARα的表達(dá)情況。通過(guò)MTT法、細(xì)胞集落形成、裸鼠皮下移植瘤、流式細(xì)胞術(shù)PI單染、藥物聯(lián)用等實(shí)驗(yàn)研究RARα對(duì)膽管癌細(xì)胞生長(zhǎng)、成瘤、細(xì)胞周期、耐藥性產(chǎn)生的影響;再采用明膠酶譜、劃痕及Transwell實(shí)驗(yàn)研究RARα對(duì)膽管癌細(xì)胞遷移侵襲能力的影響;最后通過(guò)研究RARα與Akt、Wnt信號(hào)通路間聯(lián)系來(lái)闡明RA

3、Rα對(duì)膽管癌細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移侵襲、耐藥性產(chǎn)生等生物學(xué)行為的調(diào)控機(jī)制。
　　研究結(jié)果表明，膽管癌組織中RARα表達(dá)量顯著高于癌旁組織。RARα表達(dá)下調(diào)明顯抑制膽管癌細(xì)胞DNA合成及體外增殖能力，降低細(xì)胞集落形成和裸鼠體內(nèi)成瘤能力，這可能與CyclinD1表達(dá)下調(diào)及p21表達(dá)上調(diào)有關(guān)，使細(xì)胞周期阻滯在G1/S期;RARα表達(dá)下調(diào)導(dǎo)致MMP2的mRNA及活性下降，從而抑制膽管癌細(xì)胞遷移與侵襲能力;RARα表達(dá)下調(diào)可能通過(guò)介導(dǎo)多藥耐藥相關(guān)蛋