iPDMS微陣列技術(shù)應(yīng)用于非小細(xì)胞肺癌診療的研究.pdf

1、目的:探討新型固體支撐材料改性聚二甲基硅氧烷（Integrated Poly(dimethysiloxane)，iPDMS）多肽微陣列和蛋白微陣列技術(shù)應(yīng)用于非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）診療的研究。
　　方法:第一部分對(duì)p53和EGFR胞外段的序列進(jìn)行疊瓦式切割，構(gòu)建高內(nèi)涵精細(xì)多肽庫(kù)，建立iPDMS多肽微陣列檢測(cè)方案；對(duì)150例NSCLC患者和96例健康對(duì)照者進(jìn)行血清p53和EGF

2、R多肽自身抗體的大規(guī)模篩選；應(yīng)用傳統(tǒng)生物信息學(xué)手段進(jìn)行分析研究，確定血清p53和EGFR自身抗體所識(shí)別的線性抗原表位位點(diǎn)，探討其潛在的研究?jī)r(jià)值。
　　第二部分采用iPDMS蛋白微陣列法定量檢測(cè)50例NSCLC患者、50例健康對(duì)照者血清IL-6、IL-8、MCP-1、GM-CSF的水平，結(jié)合NSCLC患者不同臨床病理參數(shù)進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:
　　第一部分 p53和EGFR多肽的自身抗體既存在于NSCLC患者血清中，也存

3、在于健康對(duì)照組的血清中，微陣列芯片表達(dá)差異顯著分析（Significance analysis of microarrays，SAM）顯示在NSCLC組和健康對(duì)照組血清中存在針對(duì)4條p53多肽和2條EGFR多肽的差異表達(dá)的自身抗體，這6條多肽的自身抗體在NSCLC患者血清的響應(yīng)明顯高于健康對(duì)照組（P<0.05），對(duì)這6條具有潛在診斷價(jià)值的多肽進(jìn)行受試者工作特征曲線（Receiver operator characteristic cur

4、ve，ROC）分析發(fā)現(xiàn)多指標(biāo)聯(lián)合的診斷模型具有更高的診斷效率，由此得到了一個(gè)由 p53-02，p53-04，p53-05和EGFR-48構(gòu)成的多指標(biāo)聯(lián)合診斷模型，該組合模型在特異度為90％時(shí)能達(dá)到36.7%的靈敏度。線性抗原位點(diǎn)分析發(fā)現(xiàn)，血清p53自身抗體的主要識(shí)別氨基端（N端）和羧基端（C端）的線性表位，而非中央熱點(diǎn)突變區(qū)，而血清EGFR自身抗體識(shí)別的高頻位點(diǎn)集中分布在EGFR胞外段L2和S2結(jié)構(gòu)域。
　　第二部分與健康對(duì)照組相

5、比，NSCLC患者血清IL-6、IL-8、GM-CSF水平顯著升高（P<0.01），MCP-1水平升高（P<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與I+II期患者相比，III+IV期患者血清IL-6水平顯著升高（P<0.01），血清MCP-1水平降低（P<0.05），血清GM-CSF水平顯著降低（P<0.01），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，血清IL-8水平的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者相比，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者血清 IL-6水平升

6、高（P<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，血清 IL-8、MCP-1、GM-CSF水平的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；與肺鱗癌患者相比，肺腺癌患者血清IL-8水平升高（P<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，血清IL-6、MCP-1、GM-CSF水平的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論:
　　1. NSCLC組和健康對(duì)照組之間存在差異性表達(dá)的p53和EGFR多肽自身抗體，可通過(guò)iPDMS多肽微陣列技術(shù)加以檢測(cè)。基于p53

7、和EGFR多肽庫(kù)的NSCLC診斷模型展示出了一定的臨床應(yīng)用前景。iPDMS多肽微陣列技術(shù)為p53和EGFR線性表位的精細(xì)定位研究提供了強(qiáng)有力的工具。
　　2.血清IL-6、IL-8、MCP-1、GM-CSF水平的改變與NSCLC的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，其血清學(xué)定量檢測(cè)不僅有助于了解 NSCLC患者的免疫功能狀態(tài)，而且對(duì)NSCLC分期、分型具有一定參考價(jià)值。
　　3. iPDMS微陣列技術(shù)小型化、高通量、多指標(biāo)、低成本的特點(diǎn)為免